海藻酸钠包埋希瓦氏菌及其对活性艳红x―3b脱色研究

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1、为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。海藻酸钠包埋希瓦氏菌及其对活性艳红X―3B脱色研究　　摘要：本研究分析腐败希瓦氏菌4H菌株通过海藻酸钠进行固定化以后对偶氮染料活性艳红X-3B的处理效果。首先以该菌培养至对数生长期的菌体为对象，确定了在CaCl2浓度为%、海藻酸钠浓度为%、微球粒径时包埋得到的微球性能最佳。用包埋了腐败希瓦氏菌4H菌体的微球分别在不同的pH、温度、染料浓度等条件下处理活性艳红X-3B，在pH为5和9时，微球对50mg/L活性艳红X-3B

2、35℃静置处理8h时的脱色率分别为%和%，而菌悬液只有%和%；在温度分别为20℃和50℃时，对50mg/L活性艳红X-3B静置处理12h时的脱色率分别为%和%，而菌悬液只有%和%；在染料浓度高达1600mg/L和3200mg/L时，微球对pH7的活性艳红X-3B在35℃静置处理48h时的脱色率分别为%和%，菌悬液为%和%。结果显示，腐败希瓦氏菌4H菌经海藻酸钠包埋固定化后形成的微球对不利环境的耐受性更强，且多次重复利用仍具较好的脱色效果，具有更好的实际应用价值。　　关键词：腐败希瓦氏菌；固定化；海藻酸钠；活性艳红X-3B；脱色为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资

3、源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。　　废水生物处理是主要利用微生物的分解作用去除水中污染物的方法，成本低且无二次污染，是现代废水处理中应用最广泛的方法之一，但印染废水由于其有机物含量高、可生化性差、色度深、水质变化大，对常规的活性污泥或生物膜等生物处理系统中的微生物生长代谢影响大，导致生物处理系统消耗快、效率低。针对这一问题，本研究以一

4、株染料脱色菌株为对象，比较将菌体通过海藻酸钠固定化技术包埋在微球里后处理染料废水时对环境条件的耐受度和脱色效果，从而分析利用包埋固定化技术提高印染废水生物处理系统效率的可行性。　　一、材料和方法　　1.菌株来源菌株Shewanellaputrefaciens4H为本实验室分离筛选。　　2.菌株的活化及生长曲线的测定将保藏菌种接种到5ml含50mg/L活性艳红X-3B的LB培养基中35℃活化培养，观察脱色时间，如脱色时间过长则重复此步骤，直至脱色时间稳定之后，将菌液按1：100比例转接至50ml含50mg/L活性艳红X-3B的LB培养基中35℃培养，定时取样检测培养物的OD600和OD525，根

5、据OD600绘制生长曲线，确定生长曲线中对数生长期的时间段。同时根据OD525计算不同时间的脱色率，确定脱色完全所需时间。　　3.海藻酸钠包埋固定化条件研究为了充分发挥“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备的作用，我们不仅把资源运用于课堂教学，还利用系统的特色栏目开展课外活动，对学生进行安全教育、健康教育、反邪教教育等丰富学生的课余文化生活。为了确保“教学点数字教育资源全覆盖”项目设备正常使用，我校做到安装、教师培训同步进行。设备安装到位后，中心校组织各学点管理人员统一到县教师进修学校进行培训，熟悉系统的使用和维护。以对数生长期菌体为对象，将菌体用无菌水悬浮至OD600值为1～2的菌悬液，然后取

6、该菌悬液与的海藻酸钠溶液充分混和，在无菌的100mL小烧杯中倒入60mL氯化钙溶液，用注射器将菌悬液和海藻酸钠的混合物滴入氯化钙溶液之中，即可形成固定化微球。此后将烧杯置于4℃的冰箱中，18h之后取出，去除氯化钙溶液，并用生理盐水洗涤固定化微球3次，再置于4℃冰箱中，保存备用。比较不同的海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、注射器口径对制得微球性能的影响，确定最佳的固定化条件。　　4.固定化微球对活性艳红X-3B的脱色研究将固定化微球在不同温度、pH、染料浓度的条件下处理活性艳红X-3B，以等量菌悬液在相同条件下的处理为对照，分析固定化对菌株生长及脱色性能的影响。并对固定化微球的重复利用效果进行了分析。　

7、　二、结果与分析　　1.菌株S.putrefaciens4H生长曲线的测定　　将S.putrefaciens4H菌株过夜活化培养后按1：100转接至50ml含50mg/L活性艳红X-3B的LB培养基中35℃、200rpm培养，每2h检测培养液的OD600值，以培养时间为横坐标，以OD600值为纵坐标绘得该菌在该培养条件下的生长曲线。　　2.菌株S.putrefaciens4H海藻酸钠固定化研究