微生物的生长繁殖及其控制

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1、幻灯片1第六章微生物的生长繁殖及其控制幻灯片2第一节细菌的生长一、相关概念及特点生物个体细胞物质有规律地、不可逆增加,导致个体体积扩大的生物学过程。生长:繁殖:生物个体生长到一定阶段,通过特定方式产生新的生命个体,即引起生命个体数量增加的生物学过程。幻灯片3生长是一个逐步发生的量变过程,繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。在高等生物里这两个过程可以明显分开,但在低等特别是在单细胞的生物里,由于细胞小,这两个过程是紧密联系又很难划分的过程。幻灯片4一个微生物细胞合适的外界条件,吸收营养物质,进行代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用个体的生长原生质

2、的总量(重量、体积、大小)就不断增加如果各细胞组分是按恰当的比例增长时,则达到一定程度后就会发生繁殖,引起个体数目的增加。群体内各个个体的进一步生长群体的生长幻灯片5微生物生长:在一定时间和条件下细胞数量的增加(微生物群体生长)在微生物学中提到的“生长”,一般均指群体生长,这一点与研究大生物时有所不同。个体生长→个体繁殖→群体生长群体生长=个体生长+个体繁殖幻灯片6微生物生长:单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的变化个体计数群体重量测定群体生理指标测定微生物生长的测定:评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响;评价不同的抗菌物质对微生

3、物产生抑制(或杀死)作用的效果;客观地反映微生物生长的规律;幻灯片7二、以数量变化对微生物生长情况进行测定(P151)1、培养平板计数法通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌)2、膜过滤培养法当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器,然后将将膜转到相应的培养基上进行培养,对形成的菌落进行统计。幻灯片83、液体稀释法(Themostprobablenumbermethod)主要适用于只能进行液体培养的微生物,或采用液体鉴别培养基进行直接鉴定并计数的微生物。对未知

4、样品进行十倍稀释,然后根据估算取三个连续的稀释度平行接种多支试管,对这些平行试管的微生物生长情况进行统计,长菌的为阳性,未长菌的为阴性,然后根据数学统计计算出样品中的微生物数目。幻灯片94、显微镜直接计数法1)常规方法:采用细菌计数板或血球计数板,在显微镜下对微生物数量进行直接计数(计算一定容积里样品中微生物的数量)。缺点:不能区分死菌与活菌;不适于对运动细菌的计数;需要相对高的细菌浓度;个体小的细菌在显微镜下难以观察;幻灯片10显微镜测数法幻灯片114、显微镜直接计数法2)其它方法:比例计数:将已知颗粒浓度的样品(例如血液)与待测细菌细胞浓度的样

5、品混匀后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。过滤计数:当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数;活菌计数:采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数幻灯片12三、以生物量为指标测定微生物的生长1、比浊法在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度(opticaldensity,即O.D.)表示菌量。实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确。幻灯片13幻灯片14幻灯片15幻灯片16幻灯片

6、172、重量法以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量;通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算微生物群体的生物量;测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法幻灯片18幻灯片19幻灯片203、生理指标法微生物的生理指标,如呼吸强度,耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。样品中微生物数量多或生长旺盛,这些指标愈明显,因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。常用于对微生物的快速鉴定与检测幻灯片21第二节细菌的群体生长繁殖幻灯片22微生物的特点:个体微小肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个单个的微生物组成的群体。微生物

7、接种是群体接种,接种后的生长是微生物群体繁殖生长。对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础幻灯片23一、分批培养1、分批培养的概念采用完全封闭的容器,一次接种,静置培养。(不更换培养基的培养方法)特点:固定的营养物质结果:细菌在一个容积有限的环境中不可能无限制地高速生长。分批培养中细菌的生长在短期内表现明显的规律性-------细菌的生长曲线。幻灯片242、分批培养中细菌群体的生长——生长曲线在微生物学中提到的“生长”,均指群体生长。生长曲线(GrowthCurve):细菌接种到定量的液体培养基中,定时取样测定细胞数量,以培养时间为横座标

8、,以菌数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。幻灯片25生长曲线的制作(P136图6-2)将少

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