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时间:2018-12-24
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1、第一节细菌和病毒遗传研究的意义 内容: 一、细菌 二、病毒 三、细菌和病毒在遗传研究的意义 四、细菌和病毒的拟有性过程 一、细菌细菌是原核生物,没有明确的核膜和线粒体等细胞器。由于其遗传简单和独特,成为遗传学研究从细胞水平到分子水平跨越的最重要试验材料之一。近年来遗传学许多重大的发现都是采用细菌作为材料的。所以细菌在遗传学研究上占有十分重要的地位。细菌的独特性表现以下三方面: 1、生长特点 ●单细胞。无性分裂;生长速度快,周期短,20分钟一个世代。 ●易培养。简单的培养基即可培养
2、。 ●易突变。且突变易鉴别。 2、遗传特点 ●染色体为裸露的DNA。 ●遗传模式类似质粒。质粒是一种独立于染色体而存在并能独立自我复制和决定某些性状的环状DNA。如大肠杆菌的F因子就是一种质粒。 3、研究细菌遗传的方法 研究细菌遗传必须具备两个条件:一是具备野生型和突变型的细菌;二是选择合适的培养基。不同的培养基用于培养不同类型的细菌。目前培养基的类型主要有以下4种: ●基本培养基。用于野生型细菌的培养。 ●完全培养基。用于突变型细菌的培养。
3、 ●选择培养基。用于鉴定突变类型。 ●补充培养基。用于具体突变类型的确定。 细菌遗传研究方法有涂布法和影印法两种。 (1)涂布法(如右图解)。基本原理是在同一培养基上根据形态变异以鉴别突变型。具体方法包括以下几步: ●繁殖。在液体培养基上培养细菌,摇动培养基使细菌裂殖呈几何级数的增加,并通过测OD值使增殖达到对线期。 ●涂板产生菌落(colony)。在固体基本培养基上滴上菌液,涂布。经过一夜培养,一个细胞经几何级数增生,可达到107个细胞,成为肉眼可见的菌落。菌
4、落具有共同的遗传组成,如果某个细胞突变,菌落也应有所不同,所以可进行鉴定。如引起小鼠肺炎双球菌(Diplococcuspneumoniae)野生的菌落大而光滑,而突变型的则是小而粗糙。 ●菌落突变鉴定。主要是通过对菌落形状、颜色和大小等方面的观察,以鉴定突变体。 取少量的菌液(菌落)↓在液体培养基上培养(繁殖)↓稀释↓固体培养基培养↓涂布均匀 长出新菌落(遗传基础一致)↓检查变异
5、 涂布法图解 (2)影印法(图解如右)。 是由LederberyJ和LederbergEM于1952年设计的,用于在不同培养基上鉴别是否发生生理、营养或抗性突变。生理特性的突变一类为丧失某种营养物质能力的营养缺陷,另一类是抗性的突变,如抗药性或感染性,抗赤霉素。影印法的步骤如下: a.先在母板(Masterplate)上长成菌落。 b.制作一个印具(比母板略小)。 c.配制各种特定的营养缺乏培养基。
6、 d.用印具先在母板上印,把菌落吸附在丝绒上,再把这个印具印到不同成分培养基上。 e.鉴定是否生长,如不长为此种营养缺陷型。 制作母板↓配制各种不同的培养基↓用模版影印到不同的培养基上↓观察生长情况 影印法图解 二、病毒●特点只有一个染色体,实际上是DNA或RNA,不含组蛋白,是由蛋白质外壳及其包被的核酸所组成的颗粒,本身无细胞器,所以必须浸染到细胞中才能生活。●分类 一般分为动物病毒、植物病毒和细菌病毒(
7、称为噬菌体(phage))等。三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 1、繁殖快,世代短。细菌20分钟一代,病毒一小时可繁殖百个。 2、易管理和化学分析。一个试管可装很多;易于获得大的数量用于分析。 3、遗传物质简单,只含裸露DNA或RNA。适用基因结构和功能研究。 4、便于研究基因突变。首先是单倍体易于表现(隐性和显性都表现)。虽然突变率<105,至少需上百个培养皿,但只要培养基上加所希望突变的抗性物质,就有望短期鉴定出来。 5、便于研究基因的作用。显隐性都表现,可设计各种营养缺陷型,
8、来对应基因的功能。 6、可用作研究高等生物的简单模型。高等生物复杂,可用细菌来代替某种研究。 四、细菌和病毒的拟有性过程 有性过程是指遗传物质的交换和交流。由于细菌和病毒无法象高等生物一样进行有性过程,只能通过其他方式实现遗传物质的交换和交流,即拟有性过程。 不经过减数分裂和授精作用而导致遗传物质的重组,叫做拟有性过程。 细菌拟有性过程的方式主要有转化和接合。病毒的拟有性过程称为转导。第二节细菌的遗传分
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