植物总rna的提取实验报告(共4篇)

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划植物总rna的提取实验报告(共4篇)　　植物总RNA的提取　　RNA的制备与分析对于了解基因在转录水平上的表达与调节和cDNA的合成都是必须的，RNA的纯度和完整性对于Northernblot，RT-PCR和cDNA文库的构建等分子生物学实验都至关重要。RNA分离的方法很多，最关键的因素是尽量减少RNA酶的污染。本实验采用异硫氰酸胍(GTC)和β-巯基乙醇等抑制RNA酶利用GTC和N-十二烷基肌

2、氨酸钠将促使核蛋白复合体解离，使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中,用乙醇沉淀方法分离RNA。本实验从番茄幼苗中提取总RNA的提取，掌握Trizol提取的方法和步骤。　　一材料与方法　　1.植物组织设备　　番茄幼苗为材料，利用移液器，冷冻高速离心机，低温冰箱，台式高速离心机，液氮罐，陶瓷研钵，离心管等设备。　　2.试剂　　本实验中所有试剂均用无RNA酶灭菌水，用将高温烘烤的玻璃瓶装蒸馏水，然后加入%的DEPC，处理过夜后高压灭菌而得到。75%乙醇，氯仿:异戊醇(24:1byvolume)或氯仿，异

3、丙醇、无水乙醇、70％乙醇，Trizol试剂等试剂由分子生物学实验室提供。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　3.实验方法　　1.50-100mg组织在液N中磨成粉末后，加入1mlTrizol液，注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。　　2.研磨液室温放置5分钟，然后以每1mlTrizol

4、液加入的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒。　　3.取上层水相于一新的离心管，加入等体积异丙醇，室温放置10分钟，10000r/min离心10分钟。　　4.弃去上清液，按每mlTrizol液加入至少1ml的比例加入70%乙醇，涡旋混匀，4℃下10000r/min离心5分钟。5.小心弃去上清液，然后室温或真空干燥5-10分钟，注意不要干燥过分，否则会降低RNA的溶解度。然后将RNA溶于TE或DEPC处理过的水中，必要时可55℃-60℃水溶10分钟。RNA可进行mRNA分离，或贮存于70%乙醇

5、并保存于-70℃。　　5.检测　　利用DNA的紫外分光光度计检测提取的RNA样品纯度和浓度。一般OD260/OD280>时，样品纯度符合要求，计算其浓度由下面公式计算。　　1OD260=40μg/mLRNA，RNA=测的OD值*40　　二实验结果01　　2　　3　　平均　　样品中的RNA浓度计算:　　RNA=测的OD值*40=*40=目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的

6、正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　样品OD260/OD280值为,介于与之间,样品纯度符合进一步实验要　　求。　　三讨论实验收获，注意事项，出现偏差结果的原因分析等。　　实验二、植物总RNA的提取　　一、实验目的：　　1.了解真核生物基因组RNA提取的一般原理。　　2.掌握Trizol提取RNA的方法和步骤。　　3.了解RNA纯度的检测。　　二、一般原理　　Trizol试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂，在匀浆和裂解过程中，能在破碎细胞、降解蛋白

7、质和其它成分,使蛋白质与核酸分离,失活RNA酶,同时能保持RNA的完整性。在氯仿抽提、离心分离后，RNA处于水相中，将水相转管后用异丙醇沉淀RNA　　Trizol试剂配制　　苯酚饱和液-380ml/l　　硫氰酸胍盐　　硫氰酸铵--　　醋酸钠pH5-　　甘油–50ml　　加水至1L目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的

8、培训计划　　三、材料　　植物组织　　四、设备　　移液器，冷冻高速离心机，低温冰箱，台式高速离心机，液氮罐，陶瓷研钵，离心管。　　五、试剂　　1、无RNA酶的无菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶装蒸馏水，然后加入%的DEPC，处理过夜后高压灭菌。　　2、75%乙醇：用DEPC处理水配制75%乙醇，，然后装入高温烘烤的玻璃瓶中，存放于低温冰箱。　　3、氯仿:异戊醇[24:1转入一新的离心管，加入等体积异丙醇，室温放置10分钟，10000r