电泳实验总结

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划电泳实验总结　　毛细管电泳和毛细管电色谱实验报告　　一．实验目的　　1.了解毛细管电泳实验的原理、分离模式及应用。　　2.掌握毛细管电泳仪的操作方法。　　3.学会处理实验数据，分析实验结果。　　二．实验原理　　毛细管电泳又称高效毛细管电泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresis,HPCE)是一种仪器分析方法。通过施加10-40kV的高电压于充有缓冲液的极细毛细管，对液体中离子或荷电粒子

2、进行高效、快速的分离。现在，HPCE已广泛应用于氨基酸、蛋白质、多肽、低聚核苷酸、DNA等生物分子分离分析，药物分析，临床分析，无机离子分析，有机分子分析，糖和低聚糖分析及高聚物和粒子的分离分析。人类基因组工程中DNA的分离是用毛细管电泳仪进行的。　　毛细管中的带电粒子在电场的作用下，一方面发生定向移动的电泳迁移，另一方面，由于电泳过程伴随电渗现象，粒子的运动速度还明显受到溶液电渗流速度的影响。粒子的实际流速V是泳流速度Vep和渗流速度Veo的矢量和。即:V=Vep+Veo目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的

3、发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　在典型的毛细管电泳分离中，溶质的分离基于溶质间电泳速率的差异。电渗流的速率绝对值一般大于粒子的电泳速率，并有效地成为毛细管电泳的驱动力。溶质从毛细管的正极端进样，带正电的粒子最先流出，中性粒子次之，带负电的粒子在中性粒子之后流出。溶质依次通过检测器，得到与色谱图极为相似的电泳分离图谱。　　三．实验仪器与试剂　　仪器：毛细管电泳仪　　试剂：缓冲液：20mmol

4、/l硼砂溶液，1mol/lNaOH溶液，二次去离子水，未知样　　四．实验步骤　　1.仪器预热和毛细管冲洗　　打开仪器和配套的工作站。工作温度设为30℃，不加电压，冲洗毛细管，顺序依次是：1mol/lNaOH溶液2min,二次去离子水2min，缓冲液4min。　　2.数据采集　　打开色谱工作站软件。把电压上升到20Kv，立即点击主界面的绿色图标—谱图采集，开始谱图采集。在进样之前把屏幕调到色谱工作站的主界面。点击主界面的红色图标—手动停止，可以停止谱图采集。然后将文件起名并保存在指定的文件夹。　　3.本实验进样条件为压力，5s时间。目的

5、-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　4.电泳运行条件为20KV，35min,在启动高压的同时，色谱工作站的记录系统也触发开始。　　5.电泳结束后，在计算机色谱工作站软件内保存好色谱图。　　6.实验结束对仪器进行冲洗，1mol/lNaOH溶液2min,二次去离子水2min，缓冲液4min。　　五．数据处理　　缓冲溶液：20mM硼砂缓冲溶液

6、　　样本：10mM苯酚和苯甲酸　　检测波长为190-600nm　　定性分析　　打开苯甲酸标准样品、苯酚样品、混合物样品这三个谱图。点击窗口中的水平平铺。通过谱图比较，能够确定哪一个峰是苯甲酸的峰。　　苯酚　　从图中可以看出苯酚的保留时间为6min。　　苯甲酸　　从图中可以看出苯甲酸的保留时间为9min。　　苯酚和苯甲酸　　从图中可以看出混合样品中两组份的保留时间分别为6min,11min。结合单组份谱图可知，此混合物为苯酚和苯甲酸的混合物。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平

7、，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　六．注意事项　　1.冲洗毛细管时禁止在毛细管上加压，不允许更改给定的电压和进样时间。　　,二次水，缓冲液，样品等之间的切换是自动的，在实验过程中要时刻注意是否放在正确位置。　　3.冲洗毛细管对于实验结果的准确性至关重要，务必认真完成每一次冲洗，不允许缩短冲洗时间或不冲洗。　　4.塑料样品管里面容易产生气泡，轻敲管壁排除气泡以后方可放入样品盘。　　SDS-PAGE电泳问题总结(XX-04-19

8、20:07:12)转载▼　　标签：杂谈分类：々☆常用技术☆々　　蛋白质条带为什么走到下面逐渐变宽发散？　　回答:多数情况是因为小分子在胶里的运动不规律，这种情况常发生在高浓度胶或凝固不一致的胶里，你可以加大阴极的缓冲液浓