ms培养基配方83357

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1、MS培养基配方成分分子量使川浓度(mg/L)大量元素硝酸钾KN03101.111900硝酸鞍NH4NO380.041650磷酸二氢钾KH2PO4136.09170硫酸镁MgSO4.7H2O246.47370氯化钙CaCI2.2H2O147.02440微量元素碘化钾KI166.010.83硼酸H3BO361.836.2硫酸猛MnSO4.4H2O223.0122.3硫酸锌ZnSO4.7H2O287.548.6钳酸钠Na2Mo04.2H2O241.950.25硫酸铜CuSO4.5H2O249.680.025氯化钻

2、COCI2.62237.930.025恢盐乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA372.2537.3硫酸亚铁FeSO24.7H2O278.0327.8有机成分肌醇100甘氨酸2盐酸硫胺索VB10.1盐酸毗哆醇VB60.5烟酸VB5或VPP0.5蔗糖sucrose342.3130g/L琼脂agar7g/LMS培养基是目前普遍使用的培养基.它有较高的无机盐浓度.对保证组织牛长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利.由于配方屮的离子浓度高•在配制.贮存.消毒等过程屮.即使有些成分略有出入.也不致影响离子间的平衡.M

3、S固休培养基可用来诱导愈伤组织.或用于胚•茎段•茎尖及花药培养•它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功•这种培养基屮的无机养分的数量和比例比较合适•足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要.说明:表屮各培养基配方中•均未列出铁盐•关于铁盐配方•除尼许培养基为柠檬酸铁10毫克/升外.其余均为:5.57克的FeSO4-7H2O(硫酸亚铁)和7.45克的Na2・EDTA(乙胺四乙酸二钠)溶于1升水的溶液.5毫升/升.须再添加氨基酸•酪蛋白水解物•酵母捉収物及椰子汁筹有机附加成分.与其它培养基的基木成分相比.

4、MS培养基中的硝酸盐•钾和鞍的含量高•这是它的明显特点.植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。MS培养基的配制包括以下步骤。培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这儿十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20借或200倍分別称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时,取其总量的1/20(50mL)或1/200(5mL),加水稀释,制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。NH4NO333000KN0338

5、000CaCI2-2H2O8800MgSO4-7H2O7400KH2PO43400微量元素(母液II)KI166H3BO31240MnSO4*4H2O4460ZnSO4-7H2O1720Na2MoO4-2H2O50CuSO4-5H2O5CoCI2-6H2O5铁盐(母液III)FeSO4-7H2O5560Na2-EDTA-2H2O7460有机成分(母液IV)IVA肌醇20000IVB盐酸毗哆醇(维牛素B6)100盐酸硫胺素(维牛素B1)100廿氨酸400以上各种营养成分的用量,除了母液I为20倍浓缩液外,其余

6、的均为200倍浓缩液。上述几种母液都要单独配成1L的贮备液。其中,母液I、母液I[及母液IV的配制方法是:每种母液屮的儿种成分称量完毕后,分别用少量的蒸徭水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1L。母液III的配制方法是:将称好的FeSO4・7H2O和Na2・EDTA£H2O分别放到450mL蒸懈水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调•至55,最后定容到1L,保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。M

7、S培养基中述需要加入2,4■二氯苯氧乙酸(2,4・D)、荼乙酸(NAA)、6节基瞟吟(6BA)等植物牛长调节物质,并且分别配成母液(01mg/fnL)o其配制方法是:分别称取这3种物质各10mg,将2,4・D和NAA川少量(1mL)无水乙醉预溶,将6BA川少量(1mL)的物质的量浓度为0.1mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100mL,即得质量浓度为01mg/fnL的母液。配制培养液用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的川量:母液I为50mL,磁II、III、IVA和IVB

8、各5mLo再取2,4D5mL.NAA1mL,与各种母液一起放入烧杯屮。配制培养液时应注意:①在使用捉前配制的母液时,应在量取各种母液Z前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如杲发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新迓行配制;②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须川所暈取的母液将暈筒或移液管润洗2次;③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。溶化琼脂用粗天平

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