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《人脐血cd44细胞分离培养与分化潜能初探》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、人脐血CD44+细胞分离培养与分化潜能初探马云胜1秦书俭2穆长征1（[基金项目]：辽宁省教育厅基金（2008403）；辽宁省自然科学基金（20072201）；辽宁省教育厅创新团队项目（2006T062）。[作者简介]：马云胜（1976-），男，辽宁省锦州市人，讲师，博士研究生；主要研究方向：干细胞多向分化潜能与组织修复。通讯作者：穆长征（1962-），男，教授，硕士生导师，方向：干细胞治疗与组织修复，E-mail:yunshengma@126.com。辽宁医学院组织胚胎学教研室,2辽宁医学院解剖学教研室,辽宁锦州1
2、21001）Isolation,culturinganddifferentiationCD44+cellsfromhumancordbloodMAYun-sheng1,QINShu-jian2,MUChang-zheng11DepartmentofHistologyandEmbryology,LiaoningMedicalCollege.2DepartmentofAnatomy,LiaoningMedicalCollege,JinzhouChina121001.[Abstract]ObjectiveIsolatea
3、ndcultureCD44+cellsfromhumancordblood,studythecharicristicsofosteogenesis,neurogenesisandadipogenesis,andselectseedcellsfortissueengineering.MethodsTheCD44+cellswereisolatedbyimmunomagneticbeadsfromcordblood.P2cellsweretostudytheabilityofosteogenesis,neurogene
4、sis,adipogenesis.Thecellsmorphologywereobserved.Thenthecellcycles,immunogenicityandphonotypeweretestedbyflowingcytometry.Theabilityofdifferentiationwastestedbyimmunohistochemistryandwesternblot.ResultsThecordbloodCD44+cellspresentedspindleshape.Thephenotypewas
5、CD44+,CD29+,CD166+,CD34-.Inosteogenicexperimentthecells’alkalinephosphatase(ALP)waspositive,andhydroxyapatitenoduleswereformedbyVon-Kossastaining.Nestin,NSEandGFAPwerepositiveinneuralinducementexperiment.redOstainingwaspositiveinadiposedifferentiationexperimen
6、t.ConclusionThecordbloodCD44+cellscoulddifferentiateintoosteoid,liparoidandneural-likecellsinvitro.Keyword:cordblood;CD44+;differentiation;seedcells[摘要]目的分离培养人脐静脉血CD44+细胞，并且诱导其向骨、神经和脂肪组织分化，为组织工程提供种子细胞来源。方法采集的脐血用免疫磁珠阳性筛选法分离CD44+细胞后进行培养。细胞分别行成骨、成神经和成脂诱导分化。观察细胞形态
7、学特征，流式细胞仪检测细胞周期、免疫原性。免疫组化及蛋白印记法检测细胞分化蛋白表达。结果人脐血CD44+细胞贴壁生长，长梭形，传代后细胞增殖迅速。细胞表型为CD44+，CD29+,CD166+，CD34-。在成骨诱导后碱性磷酸酶染色阳性，Von-Kossa染色提示钙化结节形成。成神经诱导后Nestin,NSE,GFAP阳性；Tau和β-tubulin蛋白表达阳性。脂肪诱导后油红O染色阳性。结论脐血中可分离出CD44+细胞，体外诱导可向神经、骨和脂肪方向分化。［关键词］脐血；CD44+；诱导分化；种子细胞[中图分类号
8、]R329.21[文献标识码]A[文章编号]0引言组织工程技术为临床治疗神经损伤及骨缺损治疗提供了依据，目前应用骨髓间充质干细胞（BM-MSC）治疗神经和骨缺损获得了非常好的效果[1]。但是由于种子细胞来源有限，因此使得应用受到限制。脐带血中富含多种干细胞亚群，且来源丰富。有研究表明CD34+细胞中，存在可向骨，神经和脂肪方向分化细胞亚群[2]。但该细胞数量
