人脐血cd44细胞多向分化潜能研究

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1、人脐血CD44+细胞多向分化潜能研究马云胜1秦书俭2穆长征1([基金项目]:辽宁省教育厅基金(2008403);辽宁省自然科学基金(20072201);辽宁省教育厅创新团队项目(2006T062)。[作者简介]:马云胜(1976-),男,辽宁省锦州市人,讲师,博士研究生;主要研究方向:干细胞多向分化潜能与组织修复。通讯作者:穆长征(1962-),男,教授,硕士生导师,方向:干细胞治疗与组织修复,E-mail:yunshengma@126.com。辽宁医学院组织胚胎学教研室,2辽宁医学院解剖学教研室,辽宁锦州12100

2、1)MultipotentialdifferentiationcharacteristicsofCD44+cellsfromhumancordbloodMAYun-sheng1,QINShu-jian2,MUChang-zheng11DepartmentofHistologyandEmbryology,LiaoningMedicalCollege.2DepartmentofAnatomy,LiaoningMedicalCollege,JinzhouChina121001.[Abstract]ObjectiveTost

3、udythecharicristicsofosteogenesis,neurogenesis,andadipogenesisofCD44+cellsfromhumancordblood,andselectseedcellsfortissueengineering.MethodsTheCD44+cellswereisolatedbyimmunomagneticbeadsfromcordblood.P2cellsweretostudytheabilityofosteogenesis,neurogenesis,adipog

4、enesis.Thecellsmorphologywereobserved.Thenthecellcycles,immunogenicityandphonotypeweretestedbyflowingcytometry.Theabilityofdifferentiationwastestedbyimmunohistochemistryandwesternblot.ResultsThecordbloodCD44+cellspresentedspindleshape.ThephenotypewasCD44+,CD29+

5、,CD166+,CD34-.Inosteogenicexperimentthecells’alkalinephosphatase(ALP)waspositive,andhydroxyapatitenoduleswereformedbyVon-Kossastaining.Nestin,NSEandGFAPwerepositiveinneuralinducementexperiment.redOstainingwaspositiveinadiposedifferentiationexperiment.Conclusion

6、ThecordbloodCD44+cellscoulddifferentiateintoosteoid,liparoidandneural-likecellsinvitro.Keyword:cordblood;CD44+;differentiation;seedcells[摘要]目的探讨来源于人脐静脉血CD44+细胞向骨、神经和脂肪组织分化的能力,为异体细胞移植治疗提供种子细胞来源。方法采集的脐血用免疫磁珠阳性筛选法分离CD44+细胞后进行培养。P2代细胞分别行成骨、成神经和成脂诱导分化。观察细胞形态学特征,流式细胞

7、仪检测细胞周期、免疫原性。免疫组化及蛋白印记法检测细胞分化蛋白表达。结果人脐血CD44+细胞贴壁生长,长梭形,传代后细胞增殖迅速。细胞表型为CD44+,CD29+,CD166+,CD34-。在成骨诱导后碱性磷酸酶染色阳性,Von-Kossa染色提示钙化结节形成。成神经诱导后Nestin,NSE,GFAP阳性;Tau和β-tubulinШ蛋白表达阳性。脂肪诱导后油红O染色阳性。结论脐血CD44+细胞能够在体外诱导分化为成骨细胞、成脂细胞。[关键词]脐血;CD44+;诱导分化;种子细胞[中图分类号]R329.21[文献标

8、识码]A[文章编号]0引言组织工程技术为临床治疗神经损伤及骨缺损治疗提供了依据,目前应用骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)治疗神经和骨缺损获得了非常好的效果[1]。但是由于种子细胞来源有限,因此使得应用受到限制。脐带血中富含多种干细胞亚群,且来源丰富。脐血造血干细胞(主要为CD34+细胞),主要应用于造血系统疾病

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