丙酮酸脱氢酶激酶-1在人结肠癌中的表达及意义

《丙酮酸脱氢酶激酶-1在人结肠癌中的表达及意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、丙酮酸脱氢酶激酶-1在人结肠癌中的表达及意义童晶涛，梁后杰，陈建芳，江恒，谢赣丰，刘平（第三军医大学西南医院肿瘤科，重庆400038）摘要：目的检测丙酮酸脱氢酶激酶-I（pyruvatedehydrogenasekinase-I，PDK1）在人结肠癌组织和细胞中的表达。探讨抑制PDK1对结肠癌细胞活性的影响。方法应用RT-PCR、荧光定量PCR和免疫荧光法、Westernblot检测结肠癌组织、正常结肠组织以及4种人结肠癌细胞PDK1基因的表达情况。在PDK1抑制剂（Dichloroacetate,DCA）的诱导下，通过MTT法观察结肠癌细胞活性。结果PDK1基因在

2、结肠癌组织中表达较癌旁组织中高；在4种人结肠癌细胞中明显表达。抑制PDK1(DCA)？能影响结肠癌细胞活性，抑制效应随药物浓度而递增，其中90mmol/LDCA的活性细胞率分别为（23.90±2.79）%、（5.90±1.31）%、（32.82±4.50）%和（29.72±3.03）%。结论PDK1基因在结肠癌组织和细胞中高表达，在癌旁组织中低表达，抑制PDK1明显影响结肠癌细胞活性，PDK1可望成为结肠癌有效治疗靶点。关键词：结肠肿瘤；糖原酵解；丙酮酸脱氢酶激酶-1中图分类号：R735.3文献标识码：AExpressionofpyruvatedehydrogena

3、sekinase-Iintissueandcellsofhumancoloncancerandthesignificanceofinhibitionthereof？TONGJing-tao，LIANGHou-jie，CHENJian-fang，JIANGHeng，XIEGan-feng，LIUPing（DepartmentofOncology，SouthwestHospital，ThirdMilitaryUniversity，Chongqing40038，China）Abstract：ObjectiveComparetheexpressionofpyruvatede

4、hydrogenasekinase-I(PDK1)betweenthenormalandcancercolontissueofhuman,theninvestigatesignificanceofinhibitionofPDK1.MethodsThemRNAandproteinexpressionofPDK1inthetissueandcellsweredetectedbyRT-PCRandimmunofluorescencerespectively.Dichloroacetate(DCA),aPDK1specificinhibitor,ofdifferentcon

5、centrationswasaddedintotheculturefluidofthecoloncancercellsfor48h,thenMTTmethodwasusedtoexaminethevalidityofthese.ResultsBoththemRNAandproteinexpressionofPDK1wereobservedincoloncancertissueandcelllinesofLOVO,HT-29,SW620,LS174T,whilethatwasalmostnotseeninnormaltissue.Thecellvaliditychan

6、gedobviouslywithDCAofdifferentconcentrations.ConclusionPDK1genemaybeaneffectivetherapeutictargetforcoloncancer.Keywords：Colorectalneoplasms;Glycolysis;pyruvatedehydrogenasekinase-I作者简介：童晶涛，女，浙江省宁海县人，硕士研究生，医师，主要从事结肠癌能量代谢方面的研究。电话：（023）68772772通信作者:梁后杰，E-mail:lianghoujie@sina.com收稿日期：2009

7、-07-10；修回日期：2009-09-23生物能量代谢有别于正常组织细胞是肿瘤细胞的一大生物学特点，长期处于缺氧状态中的肿瘤细胞习惯于主要通过糖酵解获能,即使在有氧情况下也是如此，这就是所谓的Warburg效应[1]。丙酮酸脱氢酶（pyruvatedehydrogenase，PDH）是糖酵解的关键限速酶，而PDH的活性受丙酮酸脱氢酶激酶（pyruvatedehydrogenasekinases，PDKs）调控[2]。抑制PDK的表达而增高PDH的活性就能进入有氧氧化途径从而切断肿瘤细胞获能的主要方式，增加的氧耗继而促进了细胞的凋亡。PDKs的4个成员中PDK1