晚期糖基化终末产物对骨髓内皮祖细胞功能的影响及意义

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1、晚期糖基化终末产物对骨髓内皮祖细胞功能的影响及意义基金项目:国家自然科学基金(30770852)SupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(30770852)作者简介:陈剑飞,男,重庆市人,博士研究生,主治医师,主要从事血管损伤、修复方面的研究,电话:(023)68774601,E-mail:chenjf0822@163.com通信作者:黄岚,E-mail:huanglan260@yahoo.com.cn收稿日期:2008-06-16;修回日期:2008-08-13陈剑飞

2、,黄岚,于世勇,宋明宝,武晓静,晋军,赵晓辉,赵刚(第三军医大学新桥医院心血管内科,全军心血管病研究所,重庆400037)摘要:目的观察体外培养的骨髓内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)在晚期糖基化终末产物(advancedglycationendproducts,AGEs)作用后功能的改变,探讨AGEs影响EPCs功能的可能机制及在动脉粥样硬化发生、发展中的作用。方法使用密度梯度离心法从骨髓获取单个核细胞并进行体外培养。对贴壁细胞进行细胞化学分析,以激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素I

3、(FITC-UEA-I)和DiI-标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-acLDL)双染色阳性细胞为正在分化的EPCs。培养细胞中加入不同浓度AGEs,测定AGEs作用后EPCs的迁移、黏附、增殖能力,同时分析细胞内活性氧浓度及细胞的凋亡情况。结果AGEs作用后EPCs生物学功能明显减退,细胞内氧化应激增强,凋亡增加;同时这种改变可以被AGEs蛋白交联阻断剂ALT711削弱。结论AGEs增加骨髓EPCs内活性氧生成,增强氧化应激,破坏细胞内环境稳定性,使细胞生物学功能受损,最终导致细胞凋亡。这种变化与AGEs浓度成正相关。关键词:晚期糖基

4、化终末产物;内皮祖细胞;动脉粥样硬化;氧化应激;凋亡中图法分类号:文献标识码:AAdvancedGlycationEndproductsAltersFunctionsinEndothelialProgenitorCellsCHENJian-fei,HUANGLan,YUShi-yong,SONGMin-bao,WUXiao-jin,JINGJun,ZHAOXiao-hui,ZHAOGang(Departmentofcardiovascular,XinqiaoHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity

5、,Chongqing400037,China)Abstract:ObjectiveTheadvancedglycationendproductsplayanimportantroleinthedevelopmentofatherosclerosis.Increasedformationofadvancedglycationendproductsisgenerallyregardedasoneofthemainmechanismsresponsibleforvasculardamage.Recentevidenceshaveshownt

6、hatbonemarrow-derivedendothelialprogenitorcellsplayapivotalroleintherepairandregenerationofthedamagedvessels.Maybeadvancedglycationendproductscouldinfluenceendothelialprogenitorcells.MethodsandResultsEPCs,isolatedfrombonemarrow,wereculturedintheabsenceorpresenceofAGEs(5

7、0,100,150,200and400µg/ml).AmodifiedBoyden’schamberwasusedtoassessthemigrationofEPCsandthenumberofreculturedEPCswascountedtomeasuretheadhesivenessfunction.Aspectrophotometerwasusedtodeterminetheproliferationfunction.ROSwereanalyzedusingtheROSassaykit.Apoptosiswasevaluate

8、dbyAnnexinVimmunostaining.Co-culturingwithAGEsinhibitstheproliferation,migrationandadhesionofEPCs,increasesROS

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