尿液荧光pcr检测结核分枝杆菌用于泌尿系结核诊断价值

《尿液荧光pcr检测结核分枝杆菌用于泌尿系结核诊断价值》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、尿液荧光PCR检测结核分枝杆菌用于泌尿系结核诊断价值【摘要】目的：使用荧光PCR技术检测泌尿系结核病人尿中结核分枝杆菌，以讨论其诊断的特异性。方法：用ROCHE公司生产的LightCyclcr免疫荧光仪检测我院门诊及住院患者尿液中结核杆菌。结果：40例泌尿系结核患者使用荧光PCR技术检测有31例尿中结核分枝杆菌TB-PCR检出阳性，阳性率为77.5%,而40例非结核患者无1例检出尿TB-PCR阳性。结论：荧光PCR技术检测尿中结核杆菌敏感性强、阳性率高、特异性高，对临床泌尿系结核的诊断具有十分重要的作

2、用。【关键词】泌尿系结核；PCR检测；诊断1资料与方法1.1病例我院2006〜2012年门诊及住院患者中经病理或实验室检查明确诊断为泌尿系结核患者40例作为实验组,40例非泌尿系结核患者作为对照组。实验组中男24例，女16例，年龄24-70岁。对照组40例，为同期住院病人中已确诊的非泌尿系结核患者，性别比例，年龄，与实验组相似。1.2方法尿液收集方法，是留取晨尿的中段尿10ml于无菌试管中，送至检验科，收到标本后，将处理后的样品2ul加入专用毛细管中4000rpm离心3min,插入圆形卡盘倒置20秒钟

3、后放入仪器中设置循环条件：93°C->2秒预变性，然后按93°C5秒一57145秒，做40个循环，最后置37工延伸1秒。本试验方法按试剂说明书操作.试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供，核酸打增仪为ROCHE公司生产的LightCyc［er（争自动荧光定量分析系统）I.ightCycler专用软件计算结果。1.3统计学处理：：采用SPSS13.0软件进行分析，计数资料比较采用x2检验，P0.05）结果见下表：3讨论泌尿系统从肾，输尿管，膀胱至尿道都可发生结核病变;发生于这些器官组织的结核病称为泌尿

4、系统结核病。泌尿系统中最常见，最先发生结核病的器官是肾，泌尿系统结核最主要是肾结核，一般都继发于其他部位的结核病灶，绝大多数继发于肺结核血行播散，或来自骨关节结核，肠结核播散。肾结核如未得到及时诊断和治疗，肾内干酪性坏死物或含结核分枝杆菌的尿液下行向输尿管，膀胱及尿道播散，形成输尿管结核，膀胱结核及尿道结核甚至波及男性生殖系统［1］。泌尿系统结核的早期诊断至今是未解决的难题。严重影响患者的预后。尿沉渣找抗酸杆菌是发现泌尿系统结核病的重要手段，但不能作为诊断肾结核的唯一依据，因包皮垢杆菌，枯草杆菌也是抗

5、酸杆菌，易和结核分枝杆菌混淆，造成假阳性。而且由于结核菌的遗传特性决定结核菌的生长周期长，致使常规检查细菌学方法存在着灵敏度低、操作复杂、需时较长和影响因素较多、不易标准化等特点。PCR是聚合酶链式反应的简称，是一种酶促化学反应，可以在试管里将待测的目的基因在很短的时问内扩增几十万倍乃至上百万倍，大大提高了基因诊断的灵敏度，降低了分析的难度［2］。荧光定量PCR技术具有较高的敏感性和特异性的特点。尿标本简单易取，取样不会给患者带来痛苦和增加感染机会，较x线检查诊断肾结核有早期诊断的优势。由此可见，荧光

6、PCR技术检测尿中结梭杆菌对临床肾结核及泌尿系结核的诊断且有无可代替的重要作用。由于PCR方法敏感性高，有假阳性的可能，因此要特别注意标本之间的污染，所用的用具应使用一次性无菌容器。而且尿标本必须采集24h尿，否则取样太少可影响尿中结核菌漏掉。标本的前处理也很重要需严格掌握实验条件，破壁不完全和DNA链被破坏均可造成假阴性［3］。本实验中40例肾结核病人尿标本31例检测阳性，阳性率77.5%,非结核泌尿系统感染病人尿标本40例均阴性。检测结果与尿涂片检抗酸杆菌阳性率有明显差异，本组确认的31例病人均多

7、次做涂片抗酸菌检测，仅6人出现阳性，阳性率％,由此看出荧光PCR技术检测尿中结核杆菌适用于临床肾结核及泌系系结核的检测，有助于早期诊断，具有不可代替的重要作用。参考文献：[1]唐神结高文•临床结核病学•北京：人民卫生出版社，2011：457[1]辛茶香，刘珍琼，熊国亮•荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌DNA的应用价值.国际检验医学杂志。2007o28(3)：196-201[2]项小丰，刘燕。利用PCR反应检测肾结核病人尿标本结核菌的探讨。吉林医药学院学报。2006.27(4)：210