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《GBT5413.15-1997-_婴幼儿配方食品和乳粉烟酸和烟酰胺的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、GB/T541315-1997前言本标准给出两种方法，方法一是微生物法，为等同采用美国公职分析化学师协会(AOAC)方法，虽然操作步骤繁杂，但测定结果准确度高。方法二是高压液相色谱法，是经实验确定的一种快速、准确的方法。本标准方法一为仲裁法。本系列标准从实施之日起，代替GB5413-85.本标准由中国轻工总会提出。本标准由全国乳品标准化中心归口。本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司。本标准主要起草人:杨金宝、
2、鄂来明、王芸、刘波。中华人民共和国国家标准婴幼儿配方食品和乳粉Gs/T5413.15-1997烟酸和烟酞胺的测定代替GB5413-85Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren-DeterminationofvitaminPPcontent范围本标准规定了用微生物法和反相高压液相色谱法测定烟酸和烟酞胺的方法。本标准方法一适用于要幼儿配方食品和乳粉中烟酸和烟酞胺的测定，方法二适用于婴儿配方乳粉中烟酸和烟酞胺的测定。方法一徽生物法方法提要通过对植物乳杆菌(Lactobacillusp
3、lantarum)生长的酸度测定来评价烟酸和烟酞胺的含量。试荆、菌种和培养荃所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。硫酸溶液，c(H,SO,)为10mol/L,将质量分数为9500^'98%的280mL浓硫酸缓慢加人到600mL水中，边加边搅拌，冷却，定容到100omL,3.2硫酸溶液,c(H,SO,)为lmol/L,将100mL1Omol/L的硫酸溶液(3.1)用水稀释至1000mLo3.3氢氧化钠溶液，c(NaOH)为150g/L,将150g氢氧化钠溶解在盛有400mL水的烧杯中，该烧杯放人冷
4、水浴中，冷却后，再用水稀释至100omL,搅拌，转移到试剂瓶中。3.4盐酸溶液，c(NCI)为0.lmol/L,吸取10mol/L的盐酸溶液lOmL，用水稀释至1000mL,3.5氢氧化钠溶液，c(NaOH)为0.lmol/L,用水稀释lmol/L的氢氧化钠溶液lOOmL至1L，用邻苯二甲酸氢钾标定。3.6乙醇溶液，体积分数为25%>将体积分数为95%的乙醇溶液250mL，用水稀释至950mL,3.7菌种:植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)e3.8培养基3.8.1乳酸杆菌琼脂培养基:光解脉15g,葡萄糖log，番
5、茄汁1oomL,磷酸二氢钾2g,聚山梨糖单油酸醋1g,琼脂log，加燕馏水至1000mL,pH6.8士0.2(250C),国家技术监，局1997一05一28批准1998一09一01实施cB/T5413.15-19973.8.2乳酸杆菌肉汤培养基:光解陈15g,葡萄糖log，番茄汁l00mL,磷酸二氢钾2g,聚山梨搪单油酸酷1g.加蒸馏水至1000mL,pH6.8士0.2(250C).3.8.3烟酸测定用培养基:维生素测定用CasaminoAcidsl2g,葡萄糖40g，乙酸钠20g,L-脆氨酸。.4g,DL一色氨酸0.2g，盐酸腺嗦吟2
6、0mg,盐酸鸟嗦吟20mg，尿啥咤20mg,盐酸硫胺素200Fag,泛酸钙200pg,盐酸毗哆醉400pg,核黄素400pg,p-氨基苯甲酸100pg，生物素。.8pg,磷酸氢二钾1g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.4g,氯化钠20mg,硫酸亚铁20mg,硫酸锰20mg。加蒸馏水至1000mL,pH6.7士0.2(250C),4仪器常用实验室仪器及:pH计。5制备5.，接种的制备从植物乳杆菌(Lactobacillusplanlaram)贮备菌种中移取部分菌体到灭菌的lOmL液体培养基中。选择30'C(士0.50C)-350C(士。.5"C
7、)之间恒温培养18^-24he5.2标准溶液的制备5.2.1烟酸标准贮备液，浓度为lOOpg/mL,从五氧化二磷干燥器中取出标样，精确称取50~60mg尼克酸，溶解在乙醇溶液(3.6)中，继续加乙醉溶液，使尼克酸的准确含量为100pg/mL，放人冰箱。5.2.2烟酸标准中间溶液，浓度为lOpg/mL.从标准贮备液(5.2.1)中吸IOOmL，加体积分数为25%乙醇溶液至1L,贮于冰箱中。5.2.3标准工作溶液，烟酸的浓度100ng/mL,从标准中间液(5-2-2)中吸5.OmL，用水稀释至500.OmL。每次使用前重新制备该标准溶液。6
8、操作步驻6.1测定溶液的制备精确称取一定量样品，约含烟酸0.lmg。转入250mL烧杯中，加10‘倍于干粉质量的2mo1/L的硫酸溶液。充分混合样品，用lmol/L的硫酸溶液(0.2)洗下瓶口边上的样品，1
