fty720对大鼠急性脊髓损伤后bax及bcl-2表达影响

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1、福建医科大学2011届硕士毕业生毕业论文FTY720对大鼠急性脊髓损伤后Bax及Bcl-2表达的影响中文摘要目的研究FTY720对大鼠急性脊髓损伤后凋亡相关因子Bcl-2、Bax表达的影响,了解FTY720对急性脊髓损伤是否有保护作用。方法150只SD大鼠随机分为:a.治疗组(FTY720治疗)60只,b.损伤组(生理盐水治疗)60只和c.假手术组(仅行椎板咬除术)30只,a组和b组采用Allen法建立T10急性脊髓损伤动物模型。术后a组FTY720按0.5mg/kg剂量一次性腹腔给药,b组和c组以等量生理盐水腹腔注射。术后共设5个时间点(6h,12h,24h,3d,7d),

2、每个时间点取a组、b组大鼠各12只,c组6只处死并取损伤区脊髓组织,分别用RT-PCR检测Bax、Bcl-2mRNA的表达,免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达及HE染色行形态学观察。结果(1)HE染色:b组24h灰质中有弥漫性出血灶,损伤区边缘炎症细胞浸润,神经元变性坏死,灰质、白质均可见神经细胞胞膜空泡化,胞质固缩;3d时灰、白质结构破坏进一步加重,灰质变性,神经元核固缩、碎裂,白质中病灶液化形成空腔;术后7d灰质区的组织炎症稍减轻,变性坏死明显,灰、白质区高倍镜下可见较多凋亡小体。a组损伤区脊髓组织结构变化同b组,但损伤区内正常神经元数量多于损伤组;伤后3d、7d

3、损伤区灰质、白质结构破坏程度及空腔形成亦轻于b组。(2)免疫组化结果:c组与a组或b组相比,各个时间点的差异均有统计学意义(P<0.01);a组Bax蛋白表达量低于b组,在12h、24h、3d、7d时间点,差异均有统计学意义(P<0.05);a组Bcl-2蛋白表达量明显高于b组,在12h、24h、3d、7d时间点,差异均有统计学意义(P<0.05),12h、3d、7d时间点统计结果P<0.01。(3)RT-PCR结果:c组与a组或b组相比,各个时间点的差异均有统计学意义(P<0.01);a组各个时间点BaxmRNA表达量均低于b组,在12h、24h、3d、7d时间点,差异均有

4、统计学意义(P<0.05);a组各个时间点Bcl-2mRNA表达量明显高于损伤组,在12h、24h、3d、7d时间点,差异均有统计学意义(P<0.05),12h、24h、3d时间点统计结果P<0.01。结论大鼠急性脊髓损伤早期,以FTY720腹腔注射治疗后,Bcl-2表达增强,Bax表达减低,Bcl-2/Bax值上调,组织损伤减轻,FTY720对神经细胞有保护作用。关键词脊髓损伤;FTY720;Bcl-2;Bax;凋亡;大鼠5福建医科大学2011届硕士毕业生毕业论文TheexpressionofBcl-2andBaxeffectedbyFTY720afteracutespin

5、alcordinjuryinratsAbstractObjectiveToobservetheeffectofFTY720ontheexpressionofBcl-2andBaxproteinintheratsafterT10acutespinalcordinjuryandtoexplorewhetherFTY720isneuroprotectiveeffectonneuronofratsafteracutespinalcordinjury.MethodsAtotalof150Sprague-Dawley(SD)ratsweredividedrandomlyinto3grou

6、psincludingthetestgroup(a):60ratstreatedwithFTY720;theinjuredgroup(b):60ratstreatedwithphysiologicalsaline(N.S)andthecontrolgroup(c):30ratswithnotreatmentafterthelaminectomy.Allratsingroupa,bwerereceived40gcfimpacttoformT10spinalcordinjury(SCI)byAllenmethodafterT9-T11laminectomybeforetheywe

7、rereceivedtreatment.whileratsingroupcwerejustreceivedtheoperationoflaminectomyinT9-T11withoutanyothertreatment.Therewasfivedifferenttimepointsincluding6hours,12hours,24hours,3days,7daysafteradministeredoroperation.Oneathtimepoint,12ratsfromgroupa,12ratsf

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