ptz诱导孕鼠痫性发作对胚胎发育的影响及bax、bcl-2、capase-3在胎鼠海马中的表达变化

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1、河北医科大学硕士学位论文PTZ诱导孕鼠痫性发作对胚胎发育的影响及bax、bcl--2、capase--3在胎鼠海马中的表达变化姓名：曲珍珍申请学位级别：硕士专业：神经病学指导教师：王维平201203中文摘要PTZ诱导孕鼠痫性发作对胚胎发育的影响及bax、bcl．2、capase．3在胎鼠海马中的表达变化摘要目的：癫痫是一种常见的神经系统慢性疾病，由神经元突然异常放电所引起的短暂大脑功能失调的综合征，具有突然性、反复发作的特点口我国约有600万．700万癫痫患者。其中一部分癫痫患者是生育年龄的妇女，每

2、年有O．3％．O。4％的新生儿来自患癫痫的母亲。在癫痫母亲所生孩子中2-6％出现发育迟缓，并且出现认知功能障碍的机率是正常母亲所生孩子的2．7倍。癫痫母亲所生子代的认知功能障碍越来越得到大家的重视，因此孕期母亲痫性发作对子代发育的影响备受关注。本文通过给予腹腔注射戊四氮(pentylenetetrazol，PTZ)慢性点燃Sprague—Dawley(SD)雌性大鼠，将点燃成功的雌性大鼠与雄性SD大鼠合笼，雌性大鼠怀孕后继续腹腔注射戊四氮至孕20天，剖腹取出胎鼠观察活胎数、死胎数、吸收胎数，测量胎鼠

3、体重身长，并用茜素红染色法对胎鼠骨骼进行染色以观察胎鼠骨骼发育情况。运用WesternBlot观察胎鼠海马组织中bax，bcl．2及caspase．3蛋白表达变化。探讨母鼠孕期痫性发作对胚胎发育的影响及bax、bcl．2、capase．3在胎鼠海马中的表达变化。方法：通过每天给予腹腔注射PTZ建立慢性点燃癫痫模型。将雌性SD大鼠30只(7．8周，起始体重200+20g)随机分为正常对照组(NC组)、盐水组(NS组假处理组)和癫痫组(PTZ组)。其中NC组、NS组、PTZ组各10只。自实验第一天起，P

4、TZ组大鼠每天上午9：00腹腔注射PTZ(35mg／kg)，NS组同时腹腔注射相应剂量的生理盐水，NC组不做任何处理，每次注射后观察1h。按照Racine分级标准，连续3次获得Ⅳ级或Ⅳ级以上的运动性惊厥的大鼠为完全点燃，待癫痫组点燃成功后继续前处理一周，将三组雌性SD大鼠与雄性SD大鼠合笼，第二天观察阴栓，有阴栓者记孕0天，各组继续孕前处理至孕20天，腹腔注射水合氯醛麻醉孕鼠后剖腹取出胎鼠，在三组孕鼠中每组随机取6只孕鼠观察其胎鼠中的活胎数、死胎数、吸收胎数，称量活胎鼠体重，测量活胎鼠身长，用茜素红

5、染色方法对胎鼠进行骨骼染色，观察胎鼠骨骼有无畸形及上枕骨、胸中文摘要骨、椎骨的发育情况。每组剩余4只孕鼠所生的胎鼠运用WesternBlot方法测定其海马组织中bax，bcl．2及caspase．3蛋白表达变化，实验中及时补充因癫痫发作死亡的大鼠。结果：l胎鼠形态学观察结果孕鼠怀孕第20天时剖腹取胎鼠观察活胎鼠比例，NS组活胎数比例(98．76％)与NC组(98．73％)相近(尸>O．05)，PTZ组活胎数比率(88．4％)较NC组和NS组明显降低(P

6、只胎鼠均出现卷尾及四肢短肢外观畸形，而NC组及NS组未观察外观畸形胎鼠，但结果没有统计学意义；对三组活胎体重的比较，采用完全随机设计的方差分析，结果显示：NC组(4．31i-0．209)、NS组(4．41+0．319)、PTZ组(4．37+0．269)无明显差异(尸>O．05)。对三组活胎身长比较，采用完全随机设计的方差分析方法分析，结果显示：NC组(3．71+0．17era)、NS组(3．72+0．12cm)、PTZ组(3．70士0．157cm)无明显差异(P>O．05)。2胎鼠骨骼染色结果NC组

7、、NS组及PTZ组活胎鼠的骨骼，没有发现明显异常，对胎鼠上枕骨及胸骨骨化程度的观察显示三组无明显差异俨>0．05)；胎鼠椎骨染色显示，NC组与NS组椎骨出现双骨化点胎鼠数无明显差异俨>O．05)，而PTZ组出现双骨化点胎鼠数较NC组和NS组明显增加，差异有统计学意义(氏0．05)。3子鼠海马Western结果PTZ组子鼠海马caspase表达水平(2．57士0．08)较NC组(0．53士0．13)和NS组(0．60土0．17)明显升高(PO．05

8、)。PTZ组子鼠海马bax表达水平(3．24土0．32)较NC组(1．55+0．11)和NS组(1．76土0．17)明显升高(PO．05)。PTZ组子鼠海马bcl．2表达水平(1．42+0．074)较NC组(2．45+0．07)和NS组(2．36士0．10)明显降低(PO．05)。结论：1大鼠孕期痫性发作对其子代外观影响较小，而可能导致子代骨骼发育延迟。2孕期痫