光温敏小麦bns雄性不育的蛋白质组的研究与分析

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1、山东农业大学硕士学位论文光温敏小麦BNS雄性不育的蛋白质组的研究与分析姓名：于松申请学位级别：硕士专业：作物遗传育种指导教师：高庆荣20120614山东农业大学硕l：学位论文中文摘要本实验以温敏小麦BNS为试材，正常播期BNS不育度100％，春播育性回复可育度(67‰88％)，取不同时期的幼穗为材料，从蛋白质组学角度利用双向电泳技术和质谱技术对温敏小麦可育株和不育株进行蛋白质表达差异的研究，以期得到不育有关的蛋白，本实验得出以下结论：1．在pH4．7，分子量10．115KD的范围内，在药隔期、减数分裂期、单核期、二核期均

2、得到400多个蛋白点。大多数等电点在pH4．5．7之间，分子量10．80KD之间居多。不同时期表达的与育性相关的蛋白不同。在单核期差异蛋白最多。2．MALDI．TOF．MS质谱阳性结果有24个，HPLC．MS／MS质谱阳性结果有四十多个，其功能分为以后几类，对温度敏感的热激蛋白，与呼吸和能量代谢有关的功能蛋白，与光合作用有关的蛋白，与翻译有关的核糖体蛋白，还有一些推定的预测蛋白。3．对鉴定出的蛋白功能分析后发现，能量代谢紊乱导致代谢供能不足，信号转导受阻导致细胞抗性减弱，翻译转录受阻，剪切因子的剪切导致基因沉默，细胞凋亡

3、导致花药发育异常及花粉败育，核糖体蛋白的缺失导致的雄性不育。光合作用有关的蛋白缺失或下调，导致不育系光合作用的酶系能正常建立，花药败育。这些蛋白质很可能直接或间接地参与了供试材料育性正常发育与败育的某些关键途径。4．BNS发育的关键蛋白。根据检索结果及蛋白质功能的分析，推测BNS的关键蛋白是ATP合成酶，它有两个亚基组成，它的表达可能受上游得热激蛋白的影响表达。当温度升高，温度感应子活性增强，ATP酶关键亚基合成量增大，小孢子育性比例提高，达到阈值以上温度时，亚基基因转录正常，所有的功能转为正常。关键词：光温敏小麦：BN

4、S：雄性不育，幼穗：蛋白质组学：双向电泳；质谱；光温敏小麦BNS雄性不育的蛋白质组的研究与分析Proteomicsresearchandtheanalysisofthermo-sensitivenuclearAbs仃actmale．．sterilelineofBNSInthepresentstudy，thermo-sensitivewheatBNSaStestmaterials，thenormalplantingperiodBNSinfertilitydegrees100％，sterilityreplywhichSOWi

5、nspringviabledegrees(67～74．2％)，takedifferentperiodofyoungpanicleformaterials，fromtheAngleofproteomics，Bytwo—dimensionalelectrophoresisandmassspectrometrytechnologystudyplantproteinexpressiondifferencesbetweenthermo-sensitivewheatfertileplantsandsterility，SO弱toobt

6、aintheproteinrelatetosterility，theexperimentresultsare笛follows：1．InthepH4—7，10-115KD，thereareabout500proteinspotsatmeiosisstage，400spotsatuninucleatestageandbinucleus，respectively．MostoftheproteininthepH4．5-7(stripalkalineside)，10-80KD．Thedifferentiationoftheprot

7、einexpressionbetweentheimmatureearsofexperimentallineshasbeenfound．2．MALDI-TOF-MSmaSsspectrometrypositiveresults24，HPLCtandemmassspectrumpositiveresultsmorethanforty，itsfunctionisdividedintofivecategories，sensitivetotemperatureheatshockprotein，andbreathenergymeta

8、bolismandthefunctionoftheprotein，andphotosynthesisoftheprotein，andtranslationrelatedribosomesprotein，andSOmeconstructivepredictionofprotein．3．Toidentifyaprotei