非小细胞肺癌患者外周血survivinmrna表达和临床意义

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1、非小细胞肺癌患者外周血SurvivinmRNA表达和临床意义【摘要】目的通过对非小细胞肺癌(Non-smallcelllungcancer,NSCLC)患者外周血生存素(Survivin)mRNA的检测；探讨其对NSCLC诊断的临床价值和意义。方法采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测55例非小细胞肺癌患者、60例对照组的外周血SurvivinmRNA的表达情况。结果SurvivinmRNA在NSCLC组的阳性率显著高于对照组(P0.05)。结论外周血Survivin可作为早期辅助诊断NSCLC及微转移的一个有价值的肿瘤标志物。【关键词】Surv

2、ivinmRNA；外周血；RT-PCR；非小细胞肺癌doi：10.3969/j.issn.1004-7484(x)・2013.06.053文章编号：1004-7484(2013)-06-2913-01肺癌目前是全世界发病率、死亡率最髙的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌占80-85%[11,但目前缺乏特异且敏感的早期病变的诊断指标。外周血中肿瘤标志物的检测有助于发现常规方法不能发现的存活于血循环中的微小肿瘤细胞灶。本研究旨在通过RT-PCR方法检测NSCLC患者外周血中survivinmRNA的表达情况，探求NSCLC早期诊断、早期血道微转移检测的特异、敏感指

3、标，为临床应用提供理论和实验依据。1材料和方法1.1实验对象选择2010年4月至2011年2月大连医科大学附属第一医院收治的相关患者。恶性肿瘤组55例：男性31例，女性24例，年龄30-77岁；其中腺癌40例，鳞癌14例，大细胞癌1例。所有病例均经病理检查证实。患者采血前均未行化疗或放疗。对照组包括肺部良性病变组30例：男性18例，女性12例，年龄23-74岁；其中肺炎19例，肺结核球4例，炎性假瘤7例。正常健康对照组30例：男性15例，女性15例，年龄21-69岁，均无心、肝、肺等器质性疾病史。1.2方法1.2.1引物合成在GeneBank查找Sur

4、vivinmRNA、3-actinmRN（内参）基因序列，引物由大连宝生物公司合O1.2.2标本采集及TotalRNA的提取用枸椽酸钠抗凝经去酶处理的采血管，取患者晨空腹肘静脉血2.0ml„淋巴细胞分层液分离核细胞，RNAisoPlus细胞裂解液裂解，氯仿，异丙醇进一步抽提总RNA。总RNA用紫外分光光度计定量，并行1%琼脂糖凝胶电泳鉴定，加入适量RNase-free灭菌水分装-80°C保存备用。1.2.3RT-PCR逆转录反应条件42°C30min、95°C5min、5°C5mino在PCR反应仪中进行。反应产物-2(TC保存备用。PCR扩增反应条件

5、94°C5min,变性94°C30s,72°C延伸lniin,共进行30个循环，最后72°C延伸5min.,SurvivinmRNA复性62°C30s,P-actinmRNA56°C30s1.3统计学处理应用SPSSV17.0统计软件包处理，用X2检验分析计数资料之间的比较，以P