黄曲霉毒素b1胶体金免疫层析试纸条的研制

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1、扬州大学硕士学位论文扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书学位论文原创性声明本人声明:所呈交的学位论文是在导师指导下独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经标明引用的内容外,论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,已在文中以明确方式标明.本声明的法律结果Fh本人承担。学位论文作者签名:声寄矢签字日期:加少年期叼El学位论文版权使用授权书本人完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子文档,许论文被查阅和借阅。本人授权扬州大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,

2、以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到‘中国学位论文全文数据库》,通过网络向社会公众提供信息服务。学位论文作者签名:卢窨美签字日期:咖年铲月1日导师签名:签字日期:妒p年厂月7日卢守英:黄曲霉毒素Bl胶体金免疫层析试纸条的研制1黄曲霉毒素B1概述.i上—JL月lJ舌人类第一次认识黄曲霉毒素危害是在20世纪60年代初,英国东南部地区一些农场的10万只火鸡幼仔死于一种病因不明的疾病。病理分析为肝脏出血,肾脏肿胀,胆管上皮细胞异常增生。由于病因不明,被定为火鸡X病。后经研究证实,此病是由于火鸡吃了含有霉变花生饼的饲料而引起,

3、由此才发现了黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)t11。黄曲霉毒素是被公认的环境污染物,主要由产毒的黄曲霉菌(Aspergillusflavus)与寄生曲霉菌(A.parasiticus)产生的一组自然发生的真菌代谢产物【zJ。AFT是目前化学致癌物中最强的一种致癌诱变剂,其毒性比氰化钾强10倍,比砒霜强68倍;其致癌性比二甲基亚硝胺强75倍,比二甲基偶氮苯强900倍。AFT广泛存在于花生、棉籽、玉米、小麦和稻米等农产品中,给人们的身体健康和消费安全带来了极大的危害【31。1.1黄曲霉毒素理化性质AFT及其衍生物有20多种,其中lO余种的化学结构已明确,从化学结构上看,各种

4、黄曲霉毒素彼此十分相似,都是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。根据其在紫外光照射下所发出荧光颜色的不同,可分为两大类:发蓝紫色荧光的为B族毒素,如AFBl、AFB2;发绿色荧光的为G族,如AFGl、AFG2。M1和M2也是黄曲霉毒素家族中较为重要的成员,它们主要是由AFBl通过肝微粒体酶作用羟化而成,主要存在于动物的代谢产物中,如乳汁、尿液和排泄物【4】。此外还有B2a、G2a、P1,Q,H1,GM和毒醇等。已知毒性大小的黄曲霉毒素排列顺序为:AFB1>AFM1>AFG1>AFB2>AFG2。其中AFB1的急性毒性最强,长期食入含有此类毒素的饲料可使动物发生肝癌等病变,也是目前发现的最

5、强致癌物【5】。各种AFT的分子量为312~346,熔点为268-269℃。AFT难溶于水、己烷、石油醚,在水中的最大溶解度只有10¨g/L,易溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、二甲基甲酰胺等有机溶剂。结晶的AFT非常稳定,高温(200℃)、紫外线照射都不能使之破坏t6

6、。AFT在酸性、中性溶液中非常稳定。在pH9~10的碱性溶液中,能迅速分解产生钠盐,荧光也随之消失。此反应是可逆的,在酸性条件下又能形成带荧光的扬州大学硕士学位论文2AFBl。AFT的水溶液对光较敏感,加入30%的甘油,可使其稳定性大为提高。1.2黄曲霉毒素B1的毒性机理AFBl在人类食物和动物饲料中非常常见,在非洲和

7、东南亚等一些地区,饮食AFBl污染是人类肝细胞癌(Hepatocellularcarc泌oma,HCC)最主要的危险因素之一。流行病学资料显示,凡是AFT污染严重的地区,也是肝癌的高发地区【7】。AFT主要侵害人和动物的肝脏,属于肝毒类,同时又是细胞毒。AFT对动物的危害主要表现在:降低采食量,影响生长速度和生产能力;损害组织器官,尤其是肝损伤;抑制免疫机能;致癌和致畸【8】。动物个体对AFT的敏感性主要和动物的种类、年龄、性别和营养条件有关。人如果食用AFBl污染的食品后,可出现发热、腹痛、呕吐等临床症状,严重者在2~3周内出现肝脾肿大、肝区疼痛、下肢浮肿及肝功能异常等中毒性肝

8、病症状【9】。AFT进入胃肠被吸收后,主要分布于肝脏,血液中分布极少,肌肉中几乎检测不到【l刚。AFBl在没有经过代谢活化之前的母体化合物是无致癌性的,因此AFBl被称为前致癌物,必须通过体内的生物转化,形成活性中间体才具有致癌性【1¨。AFBl的代谢作用发生在肝脏。AFBl经饮食摄入后,约有50%在十二指肠被吸收并主要分布在肝脏,未被吸收的AFBl通过粪便排出体外而不对机体造成损害。AFBl在体内的代谢主要是通过I相酶细胞色素P450(CYP450)超家族成员作用后形成几种亲电

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