胶体金免疫层析法快速检测黄曲霉毒素B1的研究.pdf

《胶体金免疫层析法快速检测黄曲霉毒素B1的研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2322007,Vol.28,No.02食品科学分析检测胶体金免疫层析法快速检测黄曲霉毒素B1的研究邓省亮赖卫华许杨*(南昌大学食品科学教育部重点实验室江西南昌330047)摘要本文应用胶体金免疫层析技术建立了一种快速检测食品中黄曲霉毒素B1的方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒标记抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体并喷于玻璃纤维上黄曲霉毒素B1偶联抗原和二抗鼠抗驴分别结合于硝酸纤维膜上依次将样本垫胶金垫硝酸纤维膜和吸水纸组装切割成胶体金试纸条并装入检测卡中测试结果表明黄曲霉毒素B1快速检测试纸条的灵敏度为5ng/ml检测时间为10min批内

2、和批间重复性为100%假阳性率和假阴性率均为0使用简单方便非常适合现场快速检测黄曲霉毒素B1关键词黄曲霉毒素B1胶体金免疫层析试纸条快速检测StudyonGoldImmunochromatographyAssayforRapidDetectionofAflatoxinB1DENGSheng-liangLAIWei-huaXUYang*(KeyLaboratoryofFoodScience,MinistryofEducation,NanchangUniversity,Nanchang330047,China)AbstractToestab

3、lisharapidassayfordetectionofaflatoxinB1,goldimmunochromatographyassay(GICA)wasstudied.ColloidalgoldmarkedcoupledwithmonoclonalantibodyagainstaflatoxinB1wasjetsprayedontotheglassfiber.AflatoxinB1-BSAandanti-donkeyanti-mouseimmunoglobulinswerejet-positionedontoanitrocellu

4、losemembrane.Samplepad,goldjedpad,nitrocellulosemembraneandabsorbentpaperwereassembledandcutintodetectingcard,respectively.TheresultsshowedthatthesentitivestandardofrapidassayforaflatoxinB1visualdetectionlimitis5ng/mlanddetectiontimewithin10min.Repeatabilityofstripis100%

5、.Theassaygivesnofalsepositiveandfalsenegativeresults.SoitisverysimpleandconvenienttorapidlydetectaflatoxinB1onthespot.KeywordsaflatoxinB1goldimmunochromatographyassaystriprapiddetection中图分类号TS37文献标识码A文章编号1002-6630(2007)02-0232-05黄曲霉毒素B1(aflatoxinB1称AFB1)是真菌的次级酶联免疫吸附法(ELI

6、SA)TLC法虽然具有设备简单的优代谢产物主要是由黄曲霉(Aspergillusflavus)寄生点但其灵敏度低高效液相色谱法具有灵敏度高曲霉(Aspergillusparasiticus)和特曲霉(Aspergillusnomius)分离能力强特异性好和测定结果可靠等特点但如产生[1]它易天然存在于花生棉籽玉米小麦和果食品成分复杂在进行液相色谱分离前需对样品稻米等农作物中具有强烈的毒性和致癌性它是目作彻底有效的净化处理不适合于大批量样品的检测前化学致癌物中最强的一种致癌诱变剂其毒性比氰化并且设备仪器昂贵不易普及酶联免疫吸附法是目钾强1

7、0倍其致癌性比二甲基亚硝胺强75倍1993年前常使用的一种检测方法它具有快速灵敏可定黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定量对样品纯度要求不高特别适用于大批量样品的为类致癌物其作用的靶器官主要为肝脏[2]我国曾检测但由于需要酶标仪和操作熟练的人员以及检测时对肝癌高发区的江苏广西等省连续多年进行流行病学间相对较长所以不适合现场快速检测调查和监测并在1982年颁布了粮油和发酵食品中的胶体金免疫层析方法(goldimmunochromatography[3]目前黄曲霉毒素BAFB1允许量标准1的检测方法assy,GICA)是20

8、世纪80年代发展起来的一种将胶体金主要包括薄层色谱法(TLC)高效液相色谱法(HPLC)免疫技术和色谱层析技术相结合的固相膜免疫分析方法收稿日期2005-12-22*通讯作者基金项目十五国家重大科技专项(2