2型糖尿病及其微血管并发症患者血清microrna表达谱筛选及临床价值的研究

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1、AbstractserumsofT2DMandT2DMCpatientsandmayhavethepotentialtobenovelauxiliarydiagnosisanddifferentialdiagnosisbiomarkersforT2DMandT2DMC．Keywords：type2diabetes；microvascularcomplications；serummiRNA；oxidizedlipoprotein；biomarkerV目录第l章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．12型糖尿病及其微血管并发症⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．

2、11．2微小核糖核酸背景介绍⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21-2．1微小核糖核酸的发现⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．2．2miRNA的形成及其生物学功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．3miRNA与T2DM及T2DMC之间的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．3．1miRNA与T2DM的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．3．2miRNA与T2DMC的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．4血清miRNA与T2DM及其微血管并发症⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．4．1血清miRNA与T2DM的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．71．4．2血清miR

3、NA作为糖尿病微血管并发症的生物标志物⋯⋯⋯⋯⋯81．5血清氧化脂蛋白与2型糖尿病⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8第2章T2DM及其并发症患者特异血清miRNA表达谱的筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯．102．1实验材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1l2．1．1研究对象和样本收集⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l2．1．2主要仪器及试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．1．3血清低密度芯片技术检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．1．4血清miRNA的定量分析检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．132．1．5血清氧化脂蛋白的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162．1．6数据分析与统计⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l62．2实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．172．2．1血清miRNA的低密度芯片初筛⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．172．2．2血清miRNA的复筛⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．242．2．3血清特异miRNA的大批量样本验证⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．252．2．4ROC曲线分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272．2．6T2DM及T2DMC患者血清氧化脂蛋白的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯332．2．5T2DM及T2DMC患者血清miRNA与脂蛋白和血糖的相关性分析⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31；2．2．6T2DM和T2DMC危险因素分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．362．3讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一37结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41VI目录引用文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．42在读期间发表的学术论文及研究成果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一5l致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52

6、VII第l章前言第1章前言糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一种由遗传因素和后天环境共同作用，以糖代谢功能紊乱为主要特征的慢性炎症性疾病。DM主要分为1型和2型，其中2型糖尿病(type2diabetesmellitus，T2DM)较为常见，占糖尿病总数的95％左右。最新流行病学调查显示，DM是继癌症，心血管疾病之后的第三大严重威胁人类生命健康的疾病。在发达工业国家，仅T2DM影响的人就超过其社会总人口的5％。目前，全球共有2．2亿人确诊罹患T2DM，预计到2030年，这一数字将达到3．66亿。T2DM也因此被世界卫生组织称为2l世纪的灾难。在我国，成年人群中T2DM的患

7、者超过1亿，T2DM前期人群达4．9亿，我国T2DM患病人群占世界总患病人群的三分之一【·】。1．12型糖尿病及其微血管并发症T2DM是以胰岛B细胞受损和组织的胰岛素抵抗为主要特征的慢性炎症性代谢类疾病【11。高血糖、高血脂、高血压、晚期糖化终产物(advancedglycationendproducts，AGEs)、生长因子、炎性细胞因子和高浓度的自由脂肪酸(freefattyacid，FFAs)等都可以诱导T2DM的发生【挪。T