il-17d基因对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响

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2、明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：弓越且钠导师签章-亍诱≯l忙弓月衫日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3研究论文IL-17D对人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．13附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21td‘‘沦⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．22结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．：⋯⋯⋯⋯．，25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．26综述细胞因子与肿瘤免疫逃逸的研究现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30致

4、谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．42个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43中文摘要IL一17D基因对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响摘要目的：将转染IL-17D基因的人上皮性卵巢癌细胞株种植于裸鼠皮下，观测IL一17D对裸鼠皮下移植瘤生长的影响；通过检测裸鼠体内MHCI类链相关蛋白A(MHCclassI-relatedproteinA，MICA)分子表达的变化，初步探讨IL一17D促痛作』1j的相关因素，为研究上皮性卵巢癌的免疫逃逸、耐药及诊疗提供新的线索。方法：l体外

5、培养转染IL．17D的人上皮性卵巢癌细胞SKOV3细胞(SKOV3／17D)、OVCAR3细胞(OVCAR3／17D)，各自对应的空质粒转染的SKOV3／neo细胞、OVCAR3／neo细胞(Fig．1)，37。C，5％C02的恒温培养箱中连续传代培养并冻存。2建立32只人上皮性卵巢癌细胞株裸鼠皮下移植瘤膜型，随机分成4绀：(1)SKOV3／17D组：将转染IL．17D的SKOV3细胞株种植于裸鼠皮l、．，(2)SKOV3／neo组：将转染空质粒的SKOV3细胞株等量种植于裸鼠皮I、．，(3)OVCAR3／17D组：将转染I

6、L．17D的OVCAR3细胞株种植于裸鼠皮下，(4)OVCAR3／neo组：将转染空质粒的OVCAR3细胞株等量种植于裸鼠皮下。3观察裸鼠的成瘤率、肿瘤生长情况，用游标卡尺定期测量裸鼠皮下移植瘤的大小，绘制肿瘤生长曲线。4采用qRT-PCR法检测各组裸鼠皮下移植瘤组织中IL．17D在RNA水土I￡的表达量；ELISA法检测各组荷瘤裸鼠血清中MICA的可溶性形式(solubleMICA，sMICA)的表达水平；流式细胞术(FCM)检测肿瘤组织中MICA的膜性形式(membraneMICA，mMICA)表达水平。应用SPSS13

7、．0统讣分析软件分析实验数据，以P<0．01为差异有坦著统计学意义。结果：1皮下接种4种细胞后，裸鼠成瘤率均为100％。接种SKOV3／17D细胞的裸鼠皮下移植瘤生长速度明显快于SKOV3／neo组，OVCAR3／17D中文摘要组明显快于OVCAR3／neo组(尸

8、其含量以平均荧光强度(MeanFluorescenceIntensity,MFI)表示(一X士S)：3．1SKOV3／17D组中MICA蛋白的MFI值为203．02+3．03，SKOV3／neo组为285．90士1．76，可见SKOV3／17D组MICA蛋白的表达量明显低于SKOV3／ne