mirnas在肾癌中的表达及功能研究

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1、硕士学位论文题目miRNAs在肾癌中的表达及功能研究ExpressionandfunctionofmiRNAs英文题目inrenalcellcarcinoma姓名赵春娟学号51020013所在学院医学院导师姓名余振东专业临床检验诊断学入学日期2010-9答辩日期2013-5汕头大学医学院硕士学位论文汕头大学医学院临床硕士学位论文研究生:赵春娟导师:余振东年级:2010级学制:三年制申请学位级别:医学硕士学科专业:临床检验诊断学论文提交日期:2013-5论文答辩日期:2013-5学位类型:临床医学学位学位授予单位:汕头大学

2、汕头大学医学院硕士学位论文学位论文原创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在论文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名:日期:年月日学位论文使用授权声明本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和借阅;学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文;学校可以向国家

3、有关部门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分内容。对于保密的论文,按照保密的有关规定和程序处理。作者签名:导师签名:日期:年月日日期:年月日I汕头大学医学院硕士学位论文中文摘要目的研究miRNAs(miR-122,-210,-363)在肾癌中的表达及临床相关性,并探讨miR-122在肾癌中的功能作用。方法1.本研究主要采用RT-qPCR方法检测miRNAs在肾癌中的表达情况。在本研究组前期第二代大规模平行测序的基础上,对51例肾癌及其癌旁组织样本、20例肾癌及正常对照外周血样本分别进行RNA的

4、抽提,然后将提取的RNA逆转录为cDNA,再应用RT-qPCR方法进一步验证miRNAs(miR-122,-210,-363)在肾癌与正常对照样本中的表达差异,最后对miRNAs与肾癌患者的临床病理特征之间的的相关性进行深入分析。2.本研究主要采用细胞转染试验对肾癌中miR-122的功能作用进行深入探讨。通过转染细胞后,分别进行MTT试验和划痕试验来分析细胞增殖、迁移和侵袭的程度变化,进而探讨miR-122在肾癌发生发展过程中的作用。结果1.与相应的对照组比较,miR-122和miR-210在肾癌患者的组织和外周血中表达

5、均显著升高,其中miR-122分别上调约19.74倍(P﹤0.05)、24.11倍(P﹤0.05),miR-210分别上调约7.00倍(P﹤0.05)、7.87倍(P﹤0.05);miR-363在肾癌组织中表达明显下调,平均下调约11.49%(P﹤0.05),然而在肾癌外周血中却表现为表达显著升高,平均上调约13.82倍(P﹤0.05)。且miR-363的相对表达水平与肾癌患者的年龄、病理分型及分期显著相关(P﹤0.05)。2.细胞转染后,MTT试验结果显示,与相应的negativecontrol组和空白组比较,转染pr

6、e-miR-122后肾癌细胞的增殖率明显升高,转染miR-122inhibitor后肾癌细胞增殖率显著降低(P﹤0.05);划痕试验结果显示,转染pre-miR-122后肾癌细胞的迁移和侵袭能力增强,而转染miR-122inhibitor后肾癌细胞的迁移和侵袭能力减弱。结论1.miR-122、miR-210和miR-363可能作为肾癌的肿瘤标志物,对肾癌的早期诊断有潜在II汕头大学医学院硕士学位论文的临床意义。2.miR-122、miR-210和miR-363在肾癌的进展过程中可能发挥了重要的生物学作用,miR-122可

7、能作为致癌基因促进了肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭的能力。关键词肾癌;微小RNA;肿瘤标志物III汕头大学医学院硕士学位论文ABSTRACTOBJECTIVEToinvestigatetheexpressionandclinicalrelevanceofmiRNAs(miR-122,-210,-363)inrenalcellcarcinomaanddiscussthefunctionofmiR-122inrenalcellcarcinomaMETHODS1.RT-qPCRtechnologywasusedtodetectth

8、eexpressionlevelsofmiRNAsinrenalcellcarcinoma.Basedonthesecondgenerationofmassivelyparalleledsequencingofourpreviousresearch,totalRNAswereisolatedfromtumorandm

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