sirna抑制znf139对人胃癌裸鼠原位移植瘤细胞凋亡影响及机制研究

《sirna抑制znf139对人胃癌裸鼠原位移植瘤细胞凋亡影响及机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。。。。．。?每氛研究生答名‘彩节别币答立：慈个船学篙冀氯3肋日。：l河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研

2、究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：培书导师签章：苊生今＼加心年多月工∥日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”5英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”11研究论文siRNA抑制ZNFl39对人胃癌裸鼠原位移植瘤细胞凋亡影响及机制研究前言OOOOO⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯···⋯···OOOOO⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯⋯·⋯··1。2刖舌””””⋯”““”“”””””“““””””””””””“”””””。=z材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·12结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯·⋯⋯⋯⋯⋯22附图····⋯⋯······················⋯············⋯·“””””···········“”””26附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··32讨论⋯······························································⋯············34结论······⋯·················⋯·················⋯········”·············

4、········39参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·40综述鼬蛆干扰对胃癌凋亡相关基因的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·43致谢···························································⋯············⋯·········57个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”58中文摘要siRNA抑制ZNFl38对人胃癌裸鼠原位移植瘤细胞凋亡影响及机制研究摘要目的：胃癌是一种常见的恶性肿瘤，严重威胁着人类的健康。近年大量研究表明，锌指蛋白Kriippel家族中的许多成员可以通过调控凋

5、亡相关基因的转录和表达，来介导肿瘤的发生和演进。ZNFl39就属于Klmppel家族成员。本课题组前期研究表明：ZNFl39在大多数胃癌中高表达，与胃癌的发生、发展密切相关。而ZNFl39基因的表达与胃癌细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl一2的表达是否有关尚无报道，有待于通过实验进一步证实。本实验利用重组质粒siRNA-ZNFl39沉默人胃癌细胞SGC．7901裸鼠原位移植瘤中ZNFl39基因的表达，以观察研究其对人胃癌裸鼠原位移植瘤细胞凋亡水平的影响，探讨ZNFl39与胃癌细胞凋亡的关系及机制。方法：1重组质粒siRNA．ZNFl39及阴性对照质粒contr01．siRNA由天根

6、生化科技有限公司设计合成，应用无内毒素质粒大提试剂盒提取重组质粒。抽提完毕后，所提取的质粒经紫外分光光度仪检测浓度和纯度。利用RT-PCR方法检测重组质粒siRNA．ZNFl39的沉默效率。2以人胃癌细胞株SGC．7901反复接种传代于BALB／C一(nu／nu)裸小鼠皮下形成的皮下移植瘤组织块为材料，将传代6次的组织块接种在裸小鼠胃壁浆膜层下，观察裸鼠的生存状态及移植瘤的生长情况。建立人胃癌细胞株SGC．7901裸鼠原位移植瘤动物模型。3待肿瘤直径约5ram时，将其随机分为3组，空白对照组、阴性对照组和实验组，每组5只。1天、3天、5天、7天、9天，利用微量注射器分别将生理盐水50

7、pl，contr01．siRNA20tig，重组质粒siRNA-ZNF13920ug注射入对应组的裸鼠原位移植瘤内。每天观察原位移植瘤的生长情况。4在每次对瘤内进行注射前和处死裸鼠剥取原位移植瘤后测量移植瘤的最长径(A)及最短径(B)，根据公式：肿瘤体积(mm3)=1／2×A×中文摘要B2，计算肿瘤的近似体积，并制作肿瘤的生长曲线。5对裸鼠干预5次后，于第11天颈椎脱臼处死全部裸鼠，完整剥离瘤体，称取瘤重，以计算肿瘤抑制率，肿瘤抑制率=(对照组瘤重一实验组