比较移植及体外培养对小鼠卵巢卵泡早期发育的影响

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1、华中科技大学硕士学位论文分类号学号M201075824学校代码10487密级硕士学位论文比较移植及体外培养对小鼠卵巢卵泡早期发育的影响学位申请人：王硕学科专业：妇产科学指导教师：王世宣教授答辩日期：2013年5月华中科技大学硕士学位论文AdissertationsubmittedtoHuazhongUniversityofScienceandTechnologyfortheDegreeofPostgraduateofMedicineCharacterizationandcomparisonofearlyfolliculargrow

2、thintransplanted,invitroculturedandinvivogrownmouseovariesCandidate:WangShuoMajor:ObstericandGynecologySupervisor:ProfessorWangShixuanHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaMay,2013华中科技大学硕士学位论文独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经

3、标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解

4、密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日华中科技大学硕士学位论文目录第一部分比较移植及体外培养对小鼠卵巢卵泡早期发育的影响一、中文摘要…………………………………………………………………1二、英文摘要…………………………………………………………………2三、前言………………………………………………………………………3四、材料与方法………………………………………………………………5五、实验结果…………………………………………………………………10六、讨论……

5、…………………………………………………………………15七、参考文献…………………………………………………………………21八、附图………………………………………………………………………25第二部Mir-145对小鼠颗粒细胞增殖分化和甾体激素合成的调节作用及机制探讨一、中文摘要…………………………………………………………………33二、英文摘要…………………………………………………………………33三、前言………………………………………………………………………34四、材料与方法………………………………………………………………35五、实验结

6、果…………………………………………………………………37六、讨论………………………………………………………………………41七、参考文献…………………………………………………………………43第三部分综述哺乳动物始基卵泡激活机制的研究进展………47致谢……………………………………………………………………………60华中科技大学硕士学位论文第一部分比较移植及体外培养对小鼠卵巢卵泡早期发育的影响摘要小鼠模型被广泛应用于卵巢始基卵泡激活（初始募集）基本规律及各种生长分化因子调控作用的研究中。离开体内的自然环境，卵巢必须适应环境的改变，比如二氧

7、化碳浓度、营养供给、温度及酸碱度。更重要的是，离开体内调节系统卵泡的生长会发生改变。近几年，卵巢的孵育方法主要包括体外培养和肾被膜下移植。但没有文献报道不同孵育体系对卵巢发育的影响，及孵育卵巢和在体卵巢间卵泡发育的区别。在本研究中，我们比较了体外培养卵巢、移植卵巢及体内生长卵巢中各级卵泡的数量。用免疫组化技术和半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测三个重要基因的表达及蛋白定位，包括透明体蛋白3（ZP3）、生长分化因子9（GDF-9）和抗苗勒氏管激素（AMH）。结果显示，体外培养加速卵泡激活、延缓发育卵泡的生长，影响ZP3、G

8、DF-9和AMH蛋白的表达模式。尽管移植造成少量始基卵泡的丢失，但移植卵巢的特征与体内生长卵巢非常相似，这一结果提示移植可以提供最佳的卵泡孵育环境。在体外培养体系中，alpha-ModifieEagleMedium（α-MEM）是较好的基础培养基。