黄曲霉拮抗菌株的筛选、鉴定及其活性物质的初步研究

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1、黄曲霉拮抗菌株的筛选、鉴定及其活性物质的初步研究学位论文完成日期：呈Q!圣：垒：垒指导教师签字：答辩委员会成员签字：碎善盘绽登盏青岛科技大学研究生学位论文黄曲霉拮抗菌株的筛选、鉴定及其活性物质的初步研究摘要食品安全问题倍受世界各国的高度重视，真菌产生的毒素是造成食品污染的重要来源。黄曲霉(彳spergillusflavus)是污染花生等农产品的主要菌种，黄曲霉孢子能侵染植物及其产品，从而污染到各种食品和饲料，对人类和禽类健康造成很大的影响。黄曲霉产生的黄曲霉毒素是一类毒性极强的物质，广泛地分布在发霉粮食及制品中，特别

2、是花生、花生油、玉米及其制品；乳制品和饲料中也含有较多的黄曲霉毒素。黄曲霉毒素是所有真菌毒素中毒性最强的，具有致突变、致癌和致畸的作用。然而，目前的黄曲霉毒素污染控制方法都存在各种局限性。黄曲霉毒素的污染严重威胁到人类健康和经济。目前对黄曲霉及其毒素的防治，国内外的研究主要集中在利用微生物的次生代谢产物和植物提取物来获得具有抗菌或降解毒素特性的物质。本研究采用稀释分离法从土壤中筛选出17株具有黄曲霉拮抗活性的菌株，利用拮抗菌的发酵产物来达到控制和防治黄曲霉，同时考察了17株菌对黄曲霉毒素的降解效果。实验结果如下：(1

3、)根据菌株的形态学、生理生化特性及16SrDNA序列分析等对拮抗菌进行了初步鉴定，采用分子生物学软件进行了多样性分析，结果显示，17株菌分属8个类群：Y-21．1．2、Y-32．1．1、Y-32．1．2属于枯草芽孢杆菌，Vl一4属于耐盐短杆菌，Y-17．3属于空气芽孢杆菌，Y-8．3、Y-18．2属于高地芽孢杆菌，Y41．2、Y-43—2、Y-2．3和Y-17．1属于苏云金芽孢杆菌，Y-9．1属于巨大芽孢杆菌，Y-40．1属于韩国芽孢八叠菌，Y-38．3．1、Y-38．3—2、Y-27．2、Y-1一l属于纺锤形赖氨酸

4、芽孢杆菌。(2)选取抑菌活性最强的菌株Y．17．3作进一步研究，当发酵液中加入硫酸铵的饱和度达到70％时，沉淀物抑菌活性最强，该物质对酸碱敏感，水浴温度超过50℃时，其抑菌活性消失。(3)以香豆素为惟一碳源进行黄曲霉毒素降解菌株的筛选，其中Y-21．1．2和Y-17．3对香豆素的降解效率最高；以黄曲霉毒素标准品为对照，考察了两株菌对黄曲霉毒素的降解能力，结果显示菌株Y．21．1．2和Y-17．3的降解效果良好，72h对黄曲霉毒素的降解率分别达到86．7％和90％。关键词：芽孢杆菌黄曲霉黄曲霉毒素拮抗降解青岛科技大学研

5、究生学位论文SCREENINGANDIDENTIFYOFANTAGONISTICBACTERIAAGAINST么＆PE尺G儿三【胳删y乙靥ANDCHARACTERIZATIONOFTHEACTIVECOMPOUNDSABSTRACTManycountrieshavepaidhighlyattentiontothefoodsafetyissue，thetoxinsproducedbyfungiisanimportantsourcewhichcausedthefoodpollution．Aspergillusflavus

6、isthemainfungiwhichpolluteproductproduce，forexamplepeanut．Itcausedgreatinfluenceonhumanandpoultryhealth．ThesporeofA．flavuscouldcontaminateplantandtheirproducts，SOthatpollutefoodandfeed．Aflatoxinisakindofhighlytoxicsubstanceswhichiswidelydistributedinthemoldyfoo

7、dandproducts．Especially，peanuts，peanutoil，comandtheseproductS；dairyproductsandfeedsalsocontainaflatoxin．ItiSthemosttoxicmycotoxinswhichcouldinducetheeffectsofmutagenic，teratogenicandcarcinogenic．Itthreatenshumanhealthandthedevelopmentofeconomyseriously．However,

8、existentmethodsarealwayslimitedtocontrolaflatoxinspollutionsofcrops．Therefore，wehopetofindnewwaytosolvetheseproblems．17strainswhichhaveobviousantagonisticeffectonA．flavushav