中国樱桃组培快繁及再生体系的建立

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2、文数据库》,并向社会公众提供信息服务。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名:导师签名:日期:I中国樱桃组培快繁与再生体系的建立1引言1.1研究进展1.1.1组织培养研究进展1.1.1.1茎尖、茎段培养研究进展在樱桃的离体培养中,以茎尖、茎段作为外植体最为广泛。目前已在Colt、SD-13、Gisela等砧木(董义虎等,1984;蒋启林等,1994;姜淑荣等,1996;周素平等,1998;王翠杰等,2000;孙满芝等,2000;宁淑香等,2001;刘庆忠等,2001;谷迎春等,2003;王侠礼等,2003)、甜樱桃红灯、大紫、莫利等1

3、5个品种(阎贤伟,1990;韩文璞,1994;张开春等,2000;侯修胜,2002;代红艳等,2003;代红艳等,2004),乌克兰大樱桃(刘翠兰等,2000),中华矮樱桃(韩文璞等,2000),中国樱桃乌皮(谢永红等,2003),草原樱桃希望和阿泰斯卡娅(代汉萍等,2001)及酸樱桃(唐晓杰等,2004)上培养成功,有的被应用于培育无病毒苗木,快速繁殖及建立试管苗无菌体系的实践中。目前大部分樱桃砧木是通过实生繁殖而成,而无性繁殖的还较少(苏贵兴等,1989;李师翁,1994)。所以组织培养已成为当前果树生产栽培快繁的实用方法(祁玮,19

4、95;马雪筠等,1989;李宝苹等,1989)。植物组培繁殖快,不占空间,遗传性状一致,根系发达,生长旺盛(祁玮,1995;马雪筠等,1989;阎贤伟,1990),目前有些果树已利用组培技术建立起工厂化育苗的生产线,在很多地方实现了商品化生产(韩东生等,1993;阎贤伟,1990)。樱桃(Cerasus)的离体培养研究始于20世纪80年代,经过20多年的发展,目前已在茎尖、茎段培养、叶片离体培养、不定根培养以及胚培养等方面取得了重要进展(郑红军等,2005)。茎尖、茎段培养是培育无病毒植株的一个重要途径。樱桃病毒病普遍而严重,并且还不能彻

5、底脱除。20世纪90年代以后大量采用热处理和茎尖培养相结合培育无病毒苗木的方法在樱桃上得到了广泛的应用(覃兰英等,1997)。采用茎尖、茎段培养可以在短期内大大提高繁殖率。在MS培养基上,pH为5.8时乌克兰大樱桃继代培养45天左右,增殖系数可达11(刘翠兰等,2000)。莫利甜樱桃继代培养45天增殖系数可达10.4(侯修胜,2002)。草原樱桃培养30天后,增殖系数高达5.6(代汉萍等,2001)。乌皮樱桃在MS和F14培养基中继代培养30天,增殖倍数在7-12之间(谢永红等,2003)。4山东农业大学硕士学位论文1.1.1.2茎尖、茎

6、段培养各影响因子的研究进展品种、取材及接种时期、外植体的选择及消毒、培养基、培养方式、培养温度及母树的树龄都对茎尖、茎段培养有不同程度的影响(郑红军等,2005)。宁淑香等(2001)发现,6种樱桃砧木在同一培养基中分化存在着差异。覃兰英等(1997)试验表明:樱桃休眠后取材,其成活率均高于生长期、休眠前期。王然等(1995)报道,矮樱桃在3-5月取材,只需进行一次消毒,外植体的污染率可控制在8.3%以下,且在继代培养时,芽的增殖情况优于其它时期取材的芽。由于不同品种的生理特性不同,所以在茎尖、茎段培养中,品种不同,外植体的选材也不同。矮

7、化砧木SD–13(孙满芝等,2000)、‘Colt’(蒋启林等,1994)、中华矮樱桃(韩文璞等,2000)、日本抗寒砧木北海道樱桃(谷迎春等,2003)、莫利甜樱桃(侯修胜,2002)、乌克兰大樱桃(刘翠兰等,2000)皆取萌动芽枝条或嫩梢作外植体培养成苗;草原樱桃于越冬前或早春萌芽前取1年生枝条上的腋芽(代汉萍等,2001),甜樱桃红灯、大紫、雷尼尔等(阎贤伟,1990)、Xephye(张开春等,2000),毛樱桃(周素平等,1998)皆取冬季休眠芽作外植体,乌皮樱桃(谢永红等,2003)、大樱桃矮化砧木Gisela(刘庆忠等,200

8、1)取休眠枝条作外植体培养成苗。外植体的消毒方式也对茎尖、茎段培养有很大影响。郭梁等(2009)以欧洲甜樱桃红灯为试材,研究了培养基中蔗糖及不同抗生素配比对外植体茎段培养污染率的影响,报道了外

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