番鸭呼肠孤病毒感染的分子致病机制的转录组学研究

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2、的互作指导教师；张彥定教授ｆ．＾申请学位级别：博±研究生论文提交日期：２０１５年１２月８日论文评阅人：直室论文答辩日期：２０１５年１１月３０日答辩委员会主席一帆教授：黄学位授予单位：福建师范大学学位授予日期：２０１５年１２月１９日＂＊－２０１５年１２月界＼：兰餐１％＼公—４＇．？．？ｔ，ｆｌ挙巧编马１０３９４图书分类号０９５９．９学与Ｒ２ｍ＂ｉｎ密级么开＠巧走巧必火學全日制学术学位研究生博±学位论文番鸭呼肠孤病毒感染的分子致病机制的转录

3、组学研究ＴｒａｎｓｃｒｉｔｏｍｉｃｓａｎａｌｓｉｓｏｆｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｙａｔｈｏｅｎｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＭｕｓｃｏｖｙｄｕｃｋｐｇｒｅｏｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ王全溪学科专业：动物学研究方向：宿主与病原的互作指导教师；张彥定教授申请学位级别：博壬研究生论文提交日期：２０１５年１２月８日论文评阅人：论文答辩日期：２０１５年ｎ月３０日答辩委员会主席一帆教榜：黄学位授予单位：福建师范大学学位授予日期１５年１２月１９日：２０２０１５年１２

4、月中文摘要中文摘要番鸭呼肠孤病毒（Ｍｕｓｃｏｖｙｄｕｃｋｒｅｏｖｉｍｓ，ＭＤＲＶ）是近１０年来发现的引起維番鸭较高发病率和死亡率的病毒。肝脏和脾脏是ＭＤＲＶ感染的主要範器官。为探讨，本研究Ｗ肝脏和脾脏为主要研究对象ＭＤＲＶ感染的分子致病机制，应用转录组学方法，对１０日龄番鸭转录组进行测序、组装和注释；筛选和分析了ＭＤＲＶ感染后肝脏和脾脏的差异表达基因，并对差异表达基因进行了功能分析；最后对ＭＤＲＶ感染激活机体先天性免疫功能，诱导细胞调亡的分子机制和导致肝脏脂肪变性的分子机制进行了分析和验证。研

5、究结果阐明了ＭＤＲＶ感染的分子致病机理，主要结果如下：１．本研究得到总长度１７Ｇ的转录组序列，组装得到６５，５３５个Ｕｎｉｇｅｎｅｓ，平均长度％７ｂｐ；ＣＯＧ注释共获得４１，６５１个Ｕｎｉｇｅｎｅｓ的注释，包含２５个生物学功能。２．ＭＤＲＶ感染５日龄维番鸭后第５天，差异表达基因筛选发现，脾脏有１，３５２个基因表达量上调，４，９０６个基因表达量下调；ＧＯ显著性富集分析表明，这些基因共参与了４８个生物学功能，ＫＥＧＧ显著性富集２２９个Ｐａｔｈｗ巧。３１．差异表达基因筛选发现巧脏有４１９０个基因表达量上调

6、，１１３个基因下调。，，ＧＯ显著性富集分析表明，这些基因共参与了４８个生物学功能，ＫＥＧＧ显著性富集２３７个Ｐａｔｈｗ巧。４．ＭＤＲＶ感染肝脏和脾脏差异基因的比较分析发现，脾脏的差异表达基因Ｗ下调为主，３５０，ＧＯ功能，肝脏Ｗ上调为主两个器官的共有差异表达基因１，个分析表明，送些共有差异表达基因参与了４２个生物学功能，ＫＥＧＧ功能分析表明，共有差异表达基因涉及的免疫功能的有炎症因子，先天性免疫功能，抗原提呈过程等。共有差异表达基因的获得将为进一步阐明ＭＤＲＶ感染的致病机理提供了有力的依据。５ＭＤ

7、ＲＶ感染上调了脾脏中模式识别受体ＲＩＧ－Ａ．ＫＥＧＧ分析表明，，Ｉ，ＭＤ５，ＴＬＲ－－－１，ＴＬＲ２，ＴＬＲ４的表达来识别ＭＤＲＶ，活化ＩＲＦ７促进Ｉ型ＩＦＮ的分泌和调－ＪＡＫ－ＳＴＡＴ信号节ＮＦ成信号通路促进炎症因子ＩＬ６的分泌，激活，刺激ＩＦＮ的分－ＰＣＲ验证泌，增强机体先天性免疫功能。结果经Ｑ，证实转录组数据准确可靠。６．ＴＵＮ化法和流式细胞术证实，ＭＤＲＶ感染诱导了巧脏细胞调亡。ＫＥＧＧ分析ａｓ－民Ｐ表明，ＭＤＲＶ感染通过激活了Ｆ信号通路，正１信号通路，抑制了Ｉ３Ｋ／ＡＫＴ信号Ｉ中文摘要ｅ

8、ｓｔｅｒｎ－通路诱导细胞调亡。Ｗｂｌｏｔ和ＱＰＣＲ验证表明。，转录组数据准确可靠＞＜７．ＭＤＲＶ感染肝脏中脂肪酸含量极显著的増加（／０．０１，从而诱导肝脏脂肪）变性。ＫＥＧＧ分析表明，ＭＤＲＶ感染抑制了肝细