吸血过程对全沟硬蜱基因表达及其微生物群落的影响

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1、分类号：：单位代码密级：学号：博士学位论文中文论文题目：吸血过程对全沟硬蜱基因表达及其微生物群落的影响英文论文题目：申请人姓名：张学潮指导教师：张传溪教授合作导师：徐海君副教授专业名称：牛物化学与分子生物学研究方向：蜱虫生理和蜱媒疾病所在学院：农业与生物技术学院论文提交日期年月吸血过程对全沟硬螝基因表达及其撒生物群落影论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人双向隐名评审评阅人双向隐名评审评阅人双向隐名评审评阅人双向隐名平审评阅人双向隐名评审答辩委员会主席：委员委员委员委员委员答辩日期Thedynamicchangesofgeneexpressionpatternsandmicroflo

2、raofIxodesversulcatusduringthebloodfeedingprocessAuthor'ssignature:—：浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙江大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名签字日期：乂辟月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本

3、论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：叫导师签名：签字日期年孓月妒日签字日期■年月“日摘要全沟硬裤是中国东北地区优势碑种，同时也是蜱煤疾病主要传播媒介。作为一种专性吸血的外寄生虫，血餐摄取不仅对其生活史的完成至关重要，同时也影响着病原菌和微生物群落的增殖与传播。目前，对于全沟硬蜱血餐过程中生理生化和微生物群落变化的研究匮乏，对其携带的病原菌致病机制更是知之甚少。本论文针对以上问题进行探索性研究，并得

4、到以下结论：（利用测序技术获得全沟硬蜱参考转录组（含有条并首次发现全沟硬蜱可能是利什曼原虫（载体；（分别比较了全沟硬婢不同吸血阶段表达谱，发现其吸血过程中基因表达显著改变，其中未吸血和半饱蜱虫之间差异表达的有条，半饱和饱血蜱虫之间差异表达的有条。经富集分析发现差异表达基因在与血液摄取、营养代谢、呼吸、激素合成、卵发育、免疫反应、活性氧解毒、转录翻译相关的生理过程中显著富集；（深入分析了全沟硬蜱代谢解毒酶系和抗氧化酶系，发现这些超基因家族出现物种特异性扩增，且在应对血餐摄取和消化过程中激增的外源物质和氧压时发挥重要作用；（利用区测序全面分析了全沟硬蜱吸血前后微生物群落的变化以及蜱虫叮咬

5、后大鼠血样中徵生物群落组成。分别在未吸血蜱虫、饱血蜱虫、大鼠血样中检测出了、、个菌属的细菌，其中个菌属是该三个样本共有的，推测这些细菌可能是吸血过程中经由蜱虫传播给宿主的潜在致病菌；（以裤传莱姆病螺旋体为模型，初步分析了病原菌在血餐过程中感染哺乳动物的致病机制。通过基因敲除和动物模型实验分析了莱姆病螺旋体的六个编码蛋白（发现蛋白、、可能是感染哺乳动物必需的致病因子；（制备了两种基因型莱姆病螺旋体和全菌抗血清，并利用获得的抗血清成功地对莱姆病螺旋体抗原片和幼蜱中肠病原菌进行了血清学检测；此外还利用免疫印迹法，以两种基因型莱姆病螺旋体（和全菌裂解物作为抗原，检测全沟硬蜱咬后一个月大鼠血清

6、的抗体反应，并分析了不同基因型全菌抗原检测到的特异条带之间的差异。本论文不仅首次在分子水平分析了全沟硬蜱血餐过程中的基因表达变化，而且为了解宿主共生菌互作机制以及蜱传疾病的防控提供了部分理论基础。关键词：全沟硬蜱，血餐，转录组，微生物群落，莱姆病螺旋体，血清学检测AbstractThetickIxodespersulcatusisthepredominanttickspeciesinNortheasternChina,anditisamajorvectorintransmissionoftick-bornediseases.Asobligatehematophagousectopar

7、asites,thebloodfeedingiscriticalfortickstocompletetheirlifecycle,andalsohasanimpactonpathogenandmicrobiomecolonizationandtransmission.Thusfar,littleisknownaboutthedynamicphysiologicaleventsandmicrobiomeofI.persulcatusduringthebloo