四川猪流行性腹泻病毒流行株s基因的分子特征与s蛋白抗原性的初步分析

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1、Ａ类号Ｓ８５５．３学号％０１２３巧Ｑ四川巧业大学碱：ｉｒ学位论文－ｒ？，．．．１．四川猪流行性腹泻病毒流行株Ｓ基因的分子特征与Ｓ棄白抗原性的初步分析邓丽搪导教师黄小波教授＿—义也田教授曹Ｈ杰教授预防兽医学＇专业名称研巧方向动物传染病＇＾：，皆，２０１５年６月．＇－Ｖｆ．．．■中‘．卢‘＇＇．．？＊－ｉ．．．：．．ＳｉｃｈｕａｎＡ．ｒｉｃｕ１１ｕｒａ１

2、ｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮＳｕｂｍｉｔｔｅｃＨｎ化ｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｆｏｒＭＡＳＴＥＲＤｅｇｒｅｅＭｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｏｒｃｉｎｅｅｐｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａｖｉｒｕｓｆｉｅｌｄｓｔｒａｉｎｓＳｅｎｅｉｎＳｉｃｈｕａｎａｎｄｇｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙａｎａｌｓｉｓｏｆｔｈｅａｎｔｉｅｎｉｃｉｔｏｆＳｒｏｔｅｉｎｙ

3、ｇｙｐＢｙＤｅｎＬｉｇＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＨｕａｎＸｉａｏｂｏｇＰｒｏｆ．ＷｅｎＸｉｎｔｉａｎＰｒｏｆ．ＣａｏＳａｎｉｅｊＹａａｎＳｉｃｈｕａｎ，Ｊｕｎｅ２０１５本研究受下列基金项目资助特此表示感谢国家自然科学基金项目（项目编号；Ｎｏ．３１０７２１４４）ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（ＮＮＳＦＯＣ，ＰＲＯＪＥＣＴ：Ｎｏ．３１０７２１４４）论文独创性声明

4、本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。么，研究生签名：〇年月日／／９Ｐ夕７／关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，目Ｐ：学校有权保留并向国家有关部口

5、或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。＾论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＂＂（请在Ｗ上□内划ｖ）研究生签名；年少月／方日／导师签名１心／年＾月日本１＾（＾／＾摘要猪流行性腹泻（ＰｏｒｃｉｎｅＥｐｉｄｅｍｉｃＤｉａｒｒｈｅａ，ＰＥＤ）是由猪流行性腹湾病一毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ时ｉｄｅｍｉｃＤｉａｒｒｈｅａ

6、Ｖｉｍｓ，ＰＥＤＶ）弓旭的种髙度接触性肠道传染疾病。自２０１０年Ｗ来：ＰＥＤＶ，感染已成为全球养猪业共同关注的问题。及时掌握ＰＥＤＶ流行毒株的分子特征，对指导该病具有重要意义。Ｓ基因编码的Ｓ蛋白是ＰＥＤＶ的重要结构蛋白，在诱导机体产生中和抗体和提供免疫保护等方面起关键作用，Ｓ基因较易发生变异。本研究对四川２０１４年ＰＥＤＶ流行毒株的Ｓ基因（包括Ｓ基因全序列和部分序列）进行克隆、测序和分子特性分析。，初步分析了流行株的Ｓ基因抗原性（包含ＣＯＥ区的抗原区域）研究内容如下：（

7、１）四川ＰＥＤＶ流行株Ｓ基因的克隆与分子特征分析ＷＲＴ－ＰＣ艮检测了四川１４个地区的１７个猪场的１０２份发病仔猪腹泻样本，猪场ＰＥＤＶ阳性率法到１００％（１７／１７，样品ＰＥＤＶ阳性率为８８．２％９９／１０２）。ＰＥＤＶ多为单独感染。根）（ＰＥＤＶ－ＣＶ７７７株序（ＧｅｎＢａｎ据列ｋ登录号：ＡＦ３５３５１１）设计３对引物扩增完整的Ｓ基因，选取２０１４年四川地区ＰＥＤＶ代表样品扩増了９株Ｓ基因全序列和１８－Ｓ－株１区（起止位点：ｌ１３８９ｎｔ），采用ＲＴＰＣＲ扩增Ｓ基因、克隆、测序和序

8、列分析。１８１１结果表明：Ｓ基因Ｓ１片段变异较大，株流行株Ｓ片段全长为３９抓Ｐ，－６－＾Ｔ＾编码４６个氨基酸，存在大量核巧酸的突变、插入及缺失，多ＷＣ、ＴＣ、－＾－＾ＧＴ、ＴＧ等突变形式存在。９株完整Ｓ基因中，８株全长为４１６１咕，编码１３８６个氨基酸，１株为４１２５ｂｐ，编码１３７４个氨基酸。ＰＥＤＶ四川流行株么间核巧酸序列同源性及氨基酸序列同源性均较高－Ｌ株及ＣＶ７７７疫苗株等的同，与ＳＣ－１源