针刺对tbi大鼠脑组织wnt3aβ-catenin信号通路的影响

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1、暨南大学硕士学位论文针刺对TBI大鼠脑组织Wnt3a/β-catenin信号通路的影响EffectsofacupunctureontheWnt3a/β-cateninsignalingpathwayinbrainofTBIrats作者姓名：陈声鑫指导教师姓名张毅敏及学位、职称：博士、教授学科、专业名称：中西医结合临床学位类型：专业学位论文提交日期：2015年04月论文答辩日期：2015年05月答辩委员会主席：唐纯志论文评阅人：唐纯志、唐勇学位授予单位和日期：暨南大学2015年6月30日独创性声明本

2、人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得暨南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解暨南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权暨南大

3、学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话：通讯地址：邮编：暨南大学硕士学位论文摘要目的观察针刺对创伤性颅脑损伤大鼠神经行为、脑组织形态，Wnt3a和β-catenin的mRNA及蛋白表达的影响，从Wnt/β-catenin信号通路探讨针刺促进神经修复、治疗创伤性颅脑损伤的可能作用机制。方法采用F

4、eeney’s自由落体硬膜外撞击方法制造大鼠中度创伤性颅脑损伤模型，将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和针刺组，针刺大鼠的百会（Du20）、水沟（Du26）、风府（Du16）透哑门（Du15）、合谷（LI4）；根据治疗时间再随机分为3天、7天、14天三个时间组。应用mNss方法进行神经行为学评分评估大鼠损伤程度；HE染色和尼氏染色观察各组大鼠损伤脑组织的形态学改变；实时荧光定量PCR技术、Westernblot检测损伤侧皮层Wnt3a和β-catenin的mRNA及蛋白表达。结果造模后第1天m

5、Nss评分模型组的分值明显高于正常组，比较差异有统计学意义（P<0.01），正常组与假手术组之间比较差异无统计学意义（P>0.05）,针刺组与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）；分值随着治疗时间逐渐下降，针刺组的分值较模型组下降明显，尤其在第7天两者比较差异有统计学意义（P<0.01）。HE染色病理切片在镜下观察，第3天模型组相对于正常组可见到明显的组织损伤区域，损失区周围有大量组织水肿、坏死，细胞变形、空泡样变，细胞核破碎、畸形等，第7天、14天的切片可见到损伤组织周围有新生的结缔组织填

6、充。尼氏染色镜下观察可见第3天模型组损伤区域周围细胞内尼氏小体数量明显减少，第7天、14天逐渐增加，针刺组尼氏小体的数量明显多于模型组。Q-PCR检测Wnt3a、β-catenin的基因表达量，第3天模型组Wnt3a的表达明显低于正常组（P<0.05），并随时间逐渐升高，针刺组的表达均高于模型组，尤其在第7天、14天两者比较差异有统计学意义（P<0.05）；β-catenin基因表达量变化趋势与Wnt3a基本一致。Westernblot检测Wnt3a、β-catenin的蛋白表达量，第3天模型组W

7、nt3a、β-catenin的表达均低于正常组（P<0.05），第7天、14天两者的表达量逐渐升高，针刺组较模型组升高更明显，比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论针刺能显著促进TBI大鼠脑组织的Wnt3a和β-catenin表达上调，可能是针刺治疗创伤性颅脑损伤，促进神经再生修复的重要机制之一。关键词大鼠；颅脑损伤；神经再生；针刺；Wnt3a；β-cateninI暨南大学硕士学位论文AbstractObjective:ToobservetheeffectofacupunctureontheW

8、ntsignalingpathwayinratswithtraumaticbraininjuryandtoexplorethepathogenesisandacupunctureinterventionactionontraumaticbraininjury.Methods:Feeney'sfreefallepiduralimpactmethodwasusedtoestablishatraumaticbraininjurymodelinrats;theratswererandoml