荧光裸小鼠脉络丛上皮细胞培养及其生物学特征研究

《荧光裸小鼠脉络丛上皮细胞培养及其生物学特征研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、$，口、鲁SOOCHOWUNIVERSITY硕士专业学位论文论文题目荧光裸小鼠脉络丛上皮细胞培养及其生物学特征研空研究生姓名王冕指导教师姓名王之敏专业名称临床医学（外科学）研究方向神经基础论文提交日期2015年5月本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下s独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签

2、名：日期：X.苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在____年_月解密后适用本规定。非涉密

3、论文口论文作者签名；i发日期；d，厶导师签名：7,日期：7〇“、‘（.4荧光裸小鼠脉络丛上皮细胞培养及其生物学特征研究中文摘要荧光裸小鼠脉络丛上皮细胞培养及其生物学特征研究中文摘要目的：脉络丛上皮细胞除了分泌脑脊髓液，在中枢神经系统中其它作用知之甚少，对绿色荧光裸小鼠脉络丛上皮细胞进行原代培养，旨在开发出－种有自然荧光示踪特征的工具细胞，并对其生物学特性进行研究，为进一步研究提供便利。方法：解剖显微镜下提取裸小鼠脉络丛组织，机械分离成细胞团，在盛有20%胎牛血清DMEM（F12)培养基的多孔培养板中培养，3天后第1次换液，之后每2

4、天半量换液，1周后每3天换液1次，细胞贴壁后用CCK-8及Ki-67测增殖活性，倒置荧光显微镜下观察细胞形态和密度，TTR、S100，GFAP，alpha-SMA和Nestin免疫细胞化学荧光染色对培养细胞类型进行鉴定。结果：培养的脉络丛上皮细胞稳定表达绿色荧光（EGFP），发出明亮的绿色荧光，在形态上呈多边形，伸展宽广，胞体大，几乎每个细胞都高表达脉络丛上皮细胞特异标志TTR，但不表达GFAP，alpha-SMA和Nestin，并且具有较强的增殖活性，在体外可连续传代7代。结论：本方法可成功培养表达TTR的绿色荧光裸小鼠脉络丛上

5、皮细胞，稳定表达EGFP，有望作为具有自然示踪特征的工具细胞用于相关实验之中。关键词脉络丛上皮细胞；绿色荧光裸小鼠；体外培养；作者：王冕指导老师：王之敏I英文摘要荧光裸小鼠脉络丛上皮细胞培养及其生物学特征研究Primarycultureandbiologicalcharacteristicsanalysisofthetransgenicgreenfluorescencenudemousechoroidplexusepithelialcells.AbstractObjective:Inadditiontothesecretionof

6、cerebrospinalfluid，theroleofchoroidplexusepithelialcells,inthecentralnervoussystemothereffectsispoorlyunderstood.Thechoroidplexusepithelialcellsoftransgenicgreenfluorescencenudemousewereculturedinvitro,aimedtodevelopakindofnaturalfluorescenttracingtoolofcharacteristic

7、cells,toprovideconvenienceforfurtherstuding.Methods:Pureandfleshchoroidplexustissueswereobtainedunderanatomicalmicroscope,andmechanicalseparatedintocells.CellswereculturedinDMEMmedium(F12)containing20%fetalbovineseruminacultureplate.Theproliferationactivityweremeasure

8、dbyCCK-8testandKi-67staining.TTR,S100,GFAP,alpha-SMAandNestinimmunocytochemicalfluorescencestainingwereperformedtoidentifyth