菜籽饼固态发酵菌株筛选及其发酵产品在猪日粮中的应用

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1、－；Ｓ８１６．４：６４分类巧单位代码１０３‘密：级：圓．■学巧：１２７２０２０９签傲东扯义筆学位论文．菓好饼固态发黯菌株締选及其发酷产品在猪日賴中的应用ＩｓｏｌａｔｉｏｎｏｆＳｏｌｉｄＳｔａｔ：ｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＳｆｒａｉｎｏｆＲａｐｅｓｅｅｄＣａｋｅａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＦｅｒｍｅｎｔｅｄＰｒｏｄｕｃｔｉｎＰｉｇＤｉｅｔｓ．研究生；輪蠢■指导教师：李吕木研究员合作指导教师；许发罗：副教授■申请学位口类级别；农学硕±专业名称；

2、动物营养与饲料科学研究方向：生物饲料所在学院：动物科技学院．笞辩委员会主席：二〇—五年六月＜Ｉ独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研巧成果。据我所知，除了文中特别加ｔｕ祿注巧致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育化构的学位或证书而使用过的巧料一同工作。与我的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名；綠念签字日期：年（月抑日学位论文版权使用授权书规本

3、学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的允定，有极保留并向国家有关部口或机构送交论文的复巧件和电子文件，或许论义被查鞠和借阅。本人授权安徽农业大学可Ｗ将学位论文的全部库部分内容编入有关数据库进行检繁，收录到《中国学位讼文全文数据会》，可Ｕｉｌ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社、学值公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）。签字论文作者签名：徐念指导獅签名学位日期：如片年（月／〇日签宇日期：ｃＡｃＴ年／月作日工论文作者毕业后去向；作单位：［电话：由区

4、１ｒ摘要微生物发酵可提高饲料的利用效率，是目前改善低质蛋白质饲用品质的有效方法之一。目前有关低质蛋白质饲料——菜籽粕的饲用品质改良研究较多，而有关菜籽饼的饲用品质改良研究较少。因此，本研究通过筛选高效硫苷降解菌株，对菜籽饼进行饲用品质的发酵改良，进而通过代谢试验和饲养试验探讨该菌种发酵菜籽饼饲喂猪的营养价值，以及在猪日粮中的最适添加量。1硫苷高效降解菌株的筛选、鉴定和培养条件优化。本研究以菜籽饼厂表层（1-3cm）和深层（3-6cm）土壤为分离源，利用牛肉膏蛋白胨和MRS培养基分离和纯化菌株，分别通过好氧和厌氧筛选得到菌株Y4和R1，再经16Sr

5、RNA基因序列分析确定菌株的分类地位。采用单因素和正交试验优化菌株Y4和R1的培养基碳氮源和培养条件。结果显示，Y4和R1分别与蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)和植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)亲缘关系最近。菌株Y4和R1最优碳源为玉米粉，添加量均为10g/L；最优氮源为发酵芝麻粕，添加量均为15g/L。菌株Y4最优培养条件为初始pH值为7.0，培养温度为37℃，培养时间为24h，震荡频率为150r/min。菌株R1最优培养条件为初始pH值为6.5，培养温度为35℃，培养时间为32h。2菜籽饼发酵条件优化。本研究采用单因

6、素和正交试验优化菌株Y4和R1固态好氧发酵条件：接种量、发酵温度、发酵时间、料水比（w/v）和麸皮添加量。结果显示，混菌发酵最优组合为Y4接种量为10%，R1接种量为9%，料水比（w/v）为1：1，麸皮与菜籽饼质量比为1：10（以干物质计），发酵温度为30℃，发酵时间为72h。本研究混菌发酵效果优于单菌发酵，验证试验测得硫苷、异硫氰酸酯（ITC）和噁唑烷硫酮（OZT）的降解率分别为67.26%、60.38%和53.24%，粗蛋白和小肽含量提高了2.74和2.4个百分点。Y4和R1混合固态发酵菜籽饼能够有效降解硫苷等抗营养因子，可大大改善菜籽饼的饲用品质。3发

7、酵菜籽饼营养价值评定。选择3头健康回肠末端安装“T”型瘘管的杂交阉公猪(杜×长×大，75±1.34kg)，饲喂玉米淀粉—蛋白半纯合日粮，分别以菜籽饼、发酵菜籽饼和酪蛋白作为唯一蛋白源，酪蛋白用于测定内源氮损失，外源指示剂三氧化二铬（Cr2O3）的添加量为0.3%，对菜籽饼发酵前后的营养价值进行评定。结果显示，发酵菜籽饼的消化能（DE）和代谢能（ME）分别为12.11和10.99MJ/kg，显著高于菜籽饼（P<0.05）。发酵菜籽饼的干物质和粗蛋白质的表观消化率较未发酵的菜籽饼分别提高了7.67%和13.66%（P<0.05）；回肠粗蛋白质表观（真）消化率为7

8、9.38%（86.67%），均显著高于菜籽饼（P<0