黑莓体外模拟消化产物对肝细胞损伤防护作用的研究

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1、密级：公开中图分类号：硕士学位论文论文题目：黑莓体外模拟消化产物对肝细胞损伤防护作用的研究作者姓名：庄晶晶学科专业：食品科学与工程研究方向：现代食品制造技术指导教师：陈卫副教授提交日期：二零一五年一月DissertationSubmittedtoZhejiangGongshangUniversityforMaster'sDegreeofEngineeringSTUDIESONHEPG2CELLPROTECTIVEEFFECTSOFBLACKBERRYAFTERINVITRODIGESTIONAu

2、thor:JingjingZhuangMajor:FoodScienceandEngineeringSupervisor:AssociateProfessorWeiChen办讀浙江工商大学硕士学位论文黑莓体外模拟消化产物对肝细胞损伤防护作用的研究摘要水果中的活性物质在人体胃肠消化过程中会发生转化和降解，为科学评价水果的营养价值、抗氧化活性和对人体的功能性，本文结合体外模拟胃肠道消化模型和细胞模型，研宄了黑莓在模拟胃肠道消化不同阶段的抗氧化成分多酚、黄酮、花色苷、原花青素的含量、抗氧化还原活性及对

3、肝细胞氧化损伤的防护作用，并深入探究其防护作用机理。从天然植物中挖掘安全有效的功能因子，探索其防护细胞氧化损伤的作用，已成为近年来功能性食品和天然药物研宂领域的一个热点。黑莓具有降压、降血脂和抗心律失常等功能功效，但是有关其消化产物对丙烯酰胺所致肝细胞损伤防护作用至今未见报道。本论文以丙烯酰胺为肝细胞损伤的诱导剂，结合模拟消化模型和细胞模型，从抗氧化性、细胞活力、酶活性及基因表达等几方面探宄黑莓体外消化产物对肝细胞的损伤防护作用及其相关机理。主要结果如下：黑莓体外消化产物的活性成分含量及抗氧化还

4、原活性采用模拟胃消化和模拟肠消化两个阶段的体外消化模型，发现体外胃肠消化会对黑莓多酚、黄酮、花色苷及原花青素的含量产生不同程度的影响。抗氧化实验结果表明，经模拟肠消化后，黑莓抗浙江工商大学硕士学位论文氧化活性与未消化组相比提髙了，其中未消化、冑消化和肠消化的。分别为、、；测定黑莓体外消化前后氧化还原活性结果显示，胃消化后还原能力提高，其中未消化、胃消化及肠消化组分的等价抗氧化能力分别为、、黑莓鲜重。黑莓体外消化产物对细胞的损伤防护作用使用细胞模型检测细胞活力，结果表明的黑莓体外消化组分对细胞不会

5、产生毒性，而丙烯酰胺会导致肝细胞损伤细胞存活率，而黑莓肠消化组分能显著抑制丙烯酰胺引发的细胞毒性细胞存活率。进一步运用动态荧光可视技术、分子探针等现代分子生物学技术，研宄细胞防护作用机理，发现黑莓体外消化产物能够有效降低细胞内活性氧自由基的含量，防护细胞线粒体氧化损伤和细胞核损伤，恢复线粒体膜电位及细胞谷胱甘肽的含量，从而防护了细胞的氧化损伤。黑莓体外消化产物防护细胞氧化损伤作用机理的探究通过检测细胞抗氧化酶类和的活性，发现黑莓肠消化样品能有效恢复氧化损伤导致的、酶活性降低，可见黑莓体外消化产物

6、可提高细胞内和等抗氧化酶类的活性，使机体抗氧化能力增强从而防护细胞氧化损伤。通过检测抗氧化及二相解毒酶类基因、、、、、和在转录水平上的表达变化，发现在丙烯酰胺的氧化损伤下，细胞由于自身的防御机制，使抗氧化基因的表达量有所提高，其中浙江工商大学硕士学位论文的表达量受到抑制，和基因无显著变化；而在黑莓肠消化产物的作用下，会使抗氧化基因的表达量进一步升高，增加细胞的抗氧化能力。本研宄证明黑莓体外消化产物对细胞二相解毒酶、及基因有一定的诱导作用，并通过恢复抗氧化酶和的酶活实现对细胞氧化损伤的防护作用。综

7、上所述，本文的研究结果为科学评价水果功能性因子及其防护细胞损伤作用机理的研宄提供了一种思路和方法，为开发天然、安全、有效的黑莓功能性产品提供一定的科学依据。关键词：黑莓，体外消化，细胞，丙烯酰胺，二相酶浙江工商大学硕士学位论文正浙江工商大学硕士学位论文浙江工商大学硕士学位论文，浙江工商大学硕士学位论文，浙江工商大学硕士学位论文缩略词表缩写英文全称中文全称丙烯酰胺抗氧化物反应元件二喹啉甲酸黑莓体外消化产物牛血清白蛋白过氧化氢酶’，二氯荧光素二乙酸酯焦碳酸二乙酯稀释倍数超氧阴离子二甲基亚砜世界粮农组

8、织谷胱甘肽谷胱甘肽硫转移酶血红素氧合酶国际癌症研宄机构半抑制剂量体外消化唑噻蓝线粒体膜脂质过氧化探针萘二甲醛醌氧化还原酶核因子转录因子浙江工商大学硕士学位论文未消化氧化应激磷酸盐缓冲液胃消化后肠消化后荧光定量活性氧簇一种培养基超氧化物歧化酶等价抗氧化能力水溶性四唑盐谷氨酸半胱氨酸合成酶浙江工商大学硕士学位论文目录第章绪论黑莓概况黑莓的活性成分黄嗣花色苷原花青素体外模拟胃肠道消化丙烯酰胺抗氧化防御体系抗氧化酶类抗氧化评价方法本文的立题依据、研宄内容及意义第章黑莓体外模拟消化产物活性成分及抗氧化活性