sirna沉默dad1基因表达对肾癌细胞a498增殖与侵袭能力的影响

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1、分类号Ｒ６９密级公开ＵＤＣ６１０学校代码１０５５５秦考义拿硕：ｔ学位论文（专业学位）Ｓ瓜ＮＡ沉默ＤＡＤ１基因表达对肾癌细胞Ａ４９８增殖与侵袭能力的影研究生姓名：韩庆杰指导教师、职称：吴万瑞教授合作导师、职称：专业学位类别（领域）：临床医学（外科学）研究方向：泌尿外科所在学院：附属湖南省人民医院二〇—五年五月戀冶＃义掌ｓｉＲＮＡ沉默ＤＡＤｌ基因表达对肾癌细胞Ａ４９８增殖与侵袭能力的影响论文作者签名：拜亂．指导教师

2、签名？ｔ蛛悚］论文评阅人１：王荫槐教授硕导中南大学湘雅二民院评阅人２：何乐业教授博导中南大学湘雅兰民院评阅人３：答辩委员会主席：杨金瑞教授博导中南大学湘雅二医院委员１：汤育新教授博导中南大学湘雅Ｈ民院委员２：刘紫庭教授硕导中南大学湘雅二睽院３一委员：李清副教授硕导南华大学附属第医院委员４导南华大学：谭辟副教授硕委员５：委员６：答辩日期：２０１５年０５月２０日■南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本乂在导师指导下进行的研

3、究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：韩曰Ｗ南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博／硕）±学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得Ｗ其它单位的名义

4、发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即；学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅学校可Ｗ公布学位论文的全部；或部分内容，可Ｗ采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，

5、解密后适用该授权。作者签名辟掏日誦钟叩＞＆矿ｓｉＲＮ乂沉默ＤＡＤｌ基因表达对督癌细胞Ａ４９８增殖与侵袭能力的影响摘要；背景：肾癌又称肾细胞癌（ｒｅｎａｌｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｏｍａ民ＣＣ是成人皆脏）最常见的恶性肿瘤占成人恶性肿瘤２％－３％在男性和女性恶性肿瘤中，分别排第７位和第９位。在全球范围内，每年大约新发病例２７万，其中１２万死亡，在我国，腎癌的发病率在泌尿系肿瘤中仅次于膀脫癌，并在过去２０年中每年６％速度递増。病理上肾癌可分为：透明细胞癌、肾郭头状癌、嫌

6、色细胞癌、集合管癌及未分化癌。其中透明细胞癌（ｃｌｅａｒｃｅ。ｒｅｎａｌｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａｃｃＲＣＣ）是最常见的病理类型，起源于近－曲小管上皮细胞且易发生转移占转移性肾癌的８０％８５％。，，肾癌对放疗及化疗均不敏感，手术切除仍是目前最佳的治疗手段，但术后复发率２０％－４０％约为。由于肾癌的化疗及放疗抵抗性遇此临床上没有有效的术盾治疗手段。皆癌作为泌尿科常见疾病，尤其是早期肾癌无特殊、临床表现，待出现血尿腰痛或腹部包块时多已是晚期。肾癌对放疗、…一化疗均不敏感，临床

7、上般予行肾癌根治性切除术，但是旦出现淋巴结转移，即使行根治性淋己结清扫术，患者生存期也极少超过５年，一、若出现肝肺转移或临近器官浸润则预后更差，因此摸索出条新的治疗方案变的尤为重耍。目前祀向沉默目的基因来治疗肿瘤正在被广大研究者所关注，相关研究显示沉獸肿瘤细胞中抗调亡的基因可Ｗ促。使肿瘤细胞大幅度调亡，起到治疗肿瘤的作用Ｉ目的：合成寡糖基转移酶亚基ＤＡＤｌ的ｓｉＲＮＡ序列，观察其对人Ａ４９８肾癌细胞増殖和侵袭能力的影响。－ＲＮＡ方法：设计合成兰条ＤＡＤｌｓｉ干扰片段，采用

8、脂质体法转染人Ａ４９８肾癌细胞后采用定量ＰＣ民和免疫印迹法检测转染前后人Ａ４９８肾癌细胞中ＤＡＤ１ｍＲＮＡ和蛋白的表达变化；ＭＴＴ检测转染前Ａ４９８细ＡＶ－ＰＩ流式细胞Ａ４９８肾后胞增殖能力变化；术检测各组人癌细胞转染４化后的调亡率变化；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ检测细胞侵袭能力的变化。结果：定量ＰＣ民及免疫印迹法检测显示３《ＳｉＲＮＡ均能有效抑制ＤＡＤ－ｌｍＲＮＡ及Ｐ＜００５ｌＲＮＡｌ蛋白表达