中华绒螯蟹组蛋白h1基因的克隆及其在精巢发育中的表达特征

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1、密级：学校代码：10075分类号：学号：20121256理学硕士学位论文中华绒螯蟹组蛋白H1基因的克隆及其在精巢发育中的表达特征学位申请人:钱陪陪指导教师:康现江教授学位类别:理学硕士学科专业:细胞生物学授予单位:河北大学答辩日期:二○一五年六月ClassifiedIndex:CODE:10075U.D.C:NO:20121256ADissertationfortheDegreeofM.ScienceCloningandexpressionanalysisofhistone1(H1)geneduringtestisdevelopmentinEriocheirsin

2、ensisCandidate:QianPeipeiSupervisor:Prof.KangXianjiangAcademicDegreeAppliedfor:MasterofScienceSpecialty:cytobiologyUniversity:HebeiUniversityDateofOralExamination:June,2015河北大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研宄成果，也不包含为获得河北大学或其他

3、教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了致谢。作者签名：教掩踡日期：跳年6月/0曰学位论文使用授权声明本人完全了解河北大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本学位论文属于1、保密口，在年月日解密后适用本授权声明。2、不保密iszT。(请在以上相应方格内打“V”)保护知识产权声明本人为申请河北大学学位腿交的题目为(挪伽4s匆械的学位论文，是我

4、个人在导师（顧^)指导并与导师合作下取得的研宄成果，研究工作及取得的研宄成果是在河北大学所提供的研宄经费及导师的研究经费资助下完成的。本人完全了解并严格遵守中华人民共和国为保护知识产权所制定的各项法律、行政法规以及河北大学的相关规定。本人声明如下••本论文的成果归河北大学所有，未经征得指导教师和河北大学的书面同意和授权，本人保证不以任何形式公开和传播科研成果和科研工作内容。如果违反本声明，本人愿意承担相应法律责任。声明人：_日期:对年__“A)日作者签名：日期：)丨k年6月~曰摘要摘要中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)，是我国重要的经济蟹类之一。为了

5、研究组蛋白H1在中华绒螯蟹非浓缩核形成中的作用及在其精子发生过程中的动态变化，本文采用PCR和RACE技术获得了中华绒螯蟹组蛋白H1基因的全长cDNA序列。通过生物信息学方法对该基因进行了分析，其中包括：组蛋白H1的氨基酸分析，三级结构分析和比较，同源性分析，系统树分析和基因组结构特征分析。同时采用实时定量PCR技术分析了组蛋白H1及H1-delta在中华绒螯蟹精巢发育不同时期的表达特征。研究结果如下：中华绒螯蟹组蛋白H1基因的全长cDNA序列为804bp，包括79bp的5′非编码区(5′UTR)、185bp的3′非编码区(3′UTR)和540bp的开放阅读框(O

6、RF)，共编码179个氨基酸，所编码多肽的相对分子量为18.28kDa，理论等电点pI为10.93。此研究首次成功确定、克隆并测序了中华绒螯蟹H1基因的全长cDNA序列。对比中华绒螯蟹、家鼠和鲫鱼的H1结构域的三级结构，证明H1的结构域在进化上是保守的。氨基酸序列同源性分析发现，组蛋白H1在同一属间的保守性很高（90%以上），但在不同属间的保守性却较低（50%左右），尤其是C末端结构差异很大。实时定量PCR技术的结果显示，H1及H1-delta在中华绒螯蟹精巢不同发育期均具有表达，且表达量均在精母细胞时期达到最大，之后逐渐下降，到精子期时下降至最低。H1在精原细胞

7、期、精母细胞期、精细胞期的表达量与精子期相比均呈现出显著差异（P<0.05），而H1-delta的表达量只有精母细胞期与精子期有显著差异。这些研究将为探讨组蛋白在中华绒螯蟹精子发生中的动态变化及进一步探究中华绒螯蟹精子核的非浓缩成因提供依据。关键词中华绒螯蟹非浓缩精子核组蛋白H1基因克隆实时定量PCRIAbstractAbstractEriocheirsinensis(Crustacea:Decapoda,Grapsidae)isoneoftheimportanteconomiccrabsinourcountry.Inordertoresearchtheeffec

8、tofH1