孕期及哺乳期铁补充对仔鼠铁负荷以及神经反射和学习记忆能力影响的研究

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1、分类号：R151.3,R729密级：UDC：610学校代码：11065硕士学位论文孕期及哺乳期铁补充对仔鼠铁负荷以及神经反射和学习记忆能力影响的研究王洋指导教师汪求真副教授马爱国教授学科专业名称营养与食品卫生学论文答辩日期2015年6月1日摘要目的：研究孕期及哺乳期母鼠铁补充对仔鼠铁负荷以及神经反射和学习记忆能力的影响及其相关机制。方法：将受孕第0日孕鼠随机分为三组：正常对照组（对照组，NC）、低剂量铁补充组（低铁组，LIS）和高剂量铁补充组（高铁组，HIS），每组10只，单笼饲养，自由进食全价颗粒饲料（含铁量为370mg/kg

2、），自由饮用去离子水。自妊娠第l日开始对孕鼠进行铁干预，腹腔注射右旋糖酐铁（低铁组、高铁组剂量分别为30mg/kg·bw、120mg/kg·bw，注射前用生理盐水将每只孕鼠所需右旋糖酐铁注射液稀释至2ml），对照组腹腔注射生理盐水2ml，每2日注射1次，直至仔鼠断乳。仔鼠出生后连续5w每周称量仔鼠体重，应用悬崖回避、平面翻正、负趋地性实验等测定仔鼠的神经反射功能，应用Morris水迷宫实验测定仔鼠学习记忆能力。水迷宫实验结束后对仔鼠进行麻醉，断头取血，全血静置30min，3000r/min离心10min，取上清，于-20℃冻存；

3、迅速剥离全脑组织，置于冰冷生理盐水中漂洗，滤纸拭干后称重，于-80℃冻存。应用血清铁试剂盒测量仔鼠血清铁含量，应用组织铁试剂盒测量仔鼠脑组织铁含量，应用乙酰胆碱酯酶、一氧化氮合酶试剂盒分别检测仔鼠脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶（AchE）、一氧化氮合酶（NOS）活力。结果：高铁组仔鼠血清铁含量为61.87µmol/L，显著高于对照组仔鼠的38.34µmol/L和低铁组仔鼠的38.45µmol/L（P均<0.05），低铁组和对照组血清铁含量无差异（P>0.05）。高铁组仔鼠脑组织铁含量3.28µmol/gprot，显著高于对照组仔鼠的1

4、.84µmol/gprot（P<0.05）；低铁组仔鼠脑组织铁含量（2.46µmol/gprot）与对照组相比无差异（P>0.05）。高铁组仔鼠的出生体重与对照组有显著差异（P<0.05），低铁组仔鼠出生体重与对照组仔鼠相比，差异无统计学意义（P>0.05）。自哺乳期至出生35d，高铁组仔鼠体重显著低于对照组仔鼠，出生第7d至35d低铁组仔鼠体重也低于对照组仔鼠（P<0.05），出生21d开始，高铁组仔鼠体重低于低铁组仔鼠。神经反射试验结果:负趋地性试验中，高铁组仔鼠的平均达标日龄为8.60d，显著高于对照组仔鼠的6.40d和低

5、铁组仔鼠的5.40d（P均<0.05），低铁组仔鼠与对照组仔鼠相比无差异（P>0.05）；悬崖回避试验中，高铁组仔鼠的平均达标日龄为6.90d，显著高于对照组仔鼠的3.60d和低铁组仔鼠的3.30d（P均<0.05），低铁组仔鼠与对照组仔鼠相比无差异(P>0.05)；平面翻正试验中，高铁组仔鼠平均达标日龄为6.10d，显著高于对照组仔鼠的3.90d和低铁组仔鼠的2.70d（P均<0.05），且低铁组仔鼠平均达标日龄显著低于对照组仔鼠（P<0.05)。Morris水迷宫检测学习记忆能力实验结果：定位航行实验中，训练的第2日，高铁组

6、仔鼠平均逃避潜伏期为37.80s，显著长于对照组仔鼠的26.32s（P<0.05），但与低铁组仔鼠的31.93s相比无差异（P>0.05）。训练的第5日，高铁组仔鼠平均逃避潜伏期为23.76s，显著长于对照组仔鼠的15.77s和低铁组仔鼠的12.09s（P均<0.05）。空间探索实验中，三组仔鼠的游泳速度无差异（P>0.05），穿越平台次数无差异（P>0.05）。高铁组仔鼠脑组织匀浆中AchE活力为0.18µmol/gprot显著高于对照组仔鼠的0.14µmol/gprot（P<0.05），但与低铁组仔鼠的AchE活力（0.17

7、µmol/gprot）相比，差异无统计学意义（P>0.05）。高铁组仔鼠脑组织匀浆中NOS活力为1.09µmol/gprot显著低于对照组仔鼠的1.53µmol/gprot（P>0.05），但与低铁组仔鼠的NOS活力（1.20µmol/gprot）相比，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：孕期及哺乳期母鼠铁过量补充可影响仔鼠生长发育，损伤其神经反射功能，并且对仔鼠的学习记忆能力也可产生不良影响。仔鼠脑组织铁含量过高及AchE活力升高、NOS活力下降可能是导致其学习记忆能力受损的重要原因。硕士研究生王洋（营养与食品卫生学）指导

8、教师汪求真副教授马爱国教授关键词：孕哺期；铁补充；仔鼠；神经反射；学习记忆AbstractObjectiveTostudytheeffectsofoverdoseironsupplementationinratsduringpregnancyandlactati