山羊副流感病毒3型分离、鉴定及其核衣壳蛋白的原核表达

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1、分类号Ｓ８５５．３学＾２０１３８０７１４３爲请農读义聲硕±学位论文山羊副流感病毒３型分离、鉴定及其核衣亮蛋白的原核表达王钟编指导教师江杰元研究员姜平教授学科专业兽医硕壬研究方向留［尖传染病诊断与免疫答辩日期二〇—五年五月ＴＨＥＫＯＬＡＴＩＯＮＡＮＤＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＺＡＴＩＯＮＯＦＣＡＰＲＩＮＥＰＡＲＡＩＮＦＬＵＥＮＺＡＶＩ民ＵＳ３ＡＮＤＰＲＯＫＡＲＹＯＴＩＣＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＴＨＥＮＵＣＬＥＯＣＡＰＳＩＤＰＲＯＴＥＩＮＢｙＺｈｏｎｕＷａｎｇｙ

2、ｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＰｉｎＪｉａｎｐｇｇＰｒｏｆ．ＪｉｅｕａｎＪｉａｎｙｇＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄ化ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅｒｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｐｑＦｏｒ’ｔｈｅＭａｓｔｅｒｓＤｅｒｅｅｏｆＶｅ１；ｅｒｉｎａｒｇｙＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ（）Ｃｏｍｌｅｔｄｉｎｐ；ｅＭａｙ２０１５ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＪｕｎｅ２０１５原创性说明本人郑重说明

3、：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过得作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。备（需亲笔）签名－学位论文作者：ｉ年ｔ月円ｆＩ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查重和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数

4、据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。。保密□，在年解密后适用本授权书本学位论文属于不保密＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名：年心月日Ｉ导师（需亲笔）签名：年么月曰Ｉ目录目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ英文缩略词表Ｖ一第章副流感病毒３型病原学及诊断方法研究进展１１ＰＩＶ３的形态特征及理化特性１１１Ｖ．ＰＩ３的形态特征１１．２ＰＩＶ３的理化特性２ＩＶ２Ｐ３的基因组及编码蛋白２２．１ＰＩＶ３的基因组２２．２ＮＰ蛋

5、白２２．３Ｐ蛋３ｅ２．４Ｍ蛋白３２．５Ｆ蛋白４２．６ＨＮ蛋白４２．７Ｌ蛋４ｅ３ＰＩＶ３的复制４４ＰＩＶ３的临床症状和病理变化５５ＰＩＶ３的诊断６５１３６．ＰＩＶ的病原学诊断１５丄病毒的分离６Ｔ－ＰＣ民检５．１．２病毒的民测６５．２ＰＩＶ３的血清学诊断７■５．２．１血凝（ＨＡ）和血凝抑制试验（Ｈ１）７５．２．２病毒中和试验（ＶＮ）７参考献８１第二章山羊副流感病毒３型ＪＳ２０３株的分离鉴定１３１１３＃料１．１病料来源和细胞

6、１３１．２主要试剂１３１．１４３主要仪器Ｉ山羊副流感病毒３型分离、鉴定及其核衣壳蛋白的原核表达１４１４．主要溶液的配置１．４．１５〇ｘＴＡＥ（贬存液）１４１４．．２１％琼脂糖凝胶１４２巧報１４２．１细胞的培养１４２．２病料的处理１４２．３病毒分离与传代１５２．４病毒Ｎ基因序列测定与进化分析１５２．４．１引物的设计与合成１５２．４．２病毒ＲＮＡ的提取１５２４－．．３ＲＴＰＣ艮扩增病毒的目的基因１６２．４．４病毒目的基因的回收纯化１６２１．５病毒的蚀斑纯

7、化７２．６病毒效价的测定（ＴＣＩＤｓｏ的测定）１７２．７病毒血凝效价的测定１７２．８病毒理化性质的鉴定试验１８２．８．１乙醋敏感性试验１８２．．８２膀蛋白酶敏感性试验１８２．８．３热敏感性试验１８２结果与分析１８．２１ＣＰＩＶ３ＪＳ２０１３株的分离培养结果１８２．２Ｎ基因测序与进化分析１９２．３病毒蚀斑纯化的结果２０２．４病毒效价的测定结果２０２．５血凝试验结果２１２．６病毒理化特性的试验结果２１２１艺趟敏感性试验．６．２１２６２膜蛋白酶敏感性试验２１．．２

8、．６．３热敏感性试验２１３论２１参考；