广西prrsv地方流行毒株的分离鉴定及对高免血清反应研究

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1、巧古学位论义广西PRRSV地方流行毒株的分离鉴定及对髙免血清反应研究洪绍锋..‘‘'..?.'.^I.:'■■.:,:-殘I巧乂學二〇—五年六月'.分类号s巧5.3密级公开UDC578硕±学位论文广西PRRSV地方流行毒株的分离鉴定及对高免血清反应研究洪绍锋学科专业预防兽医学昭教授指导教师黄伟论文答辩日期2015年5月23日学位授予日期2015年6月30日答辩委员会主席罗廷

2、荣教授广西大学学位论文原钥性和使用授权声明本人声明所呈交的论文,是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加W标注和致谢的地方外,论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的研究成果,也不包含本人或他人为获得广西大一学或其它单位的学位而使用过的材料。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品,知识产权归:属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权,即学校有权保存并

3、向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可W将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行、、。检索和传播,可采用影印缩印或其它复制手段保存汇编学位论文本学位论文属于:□保密,在年解密后适用授权。Ef不保密。""(请在{^上相应方框内打V)6‘论文作者签名:後£日期:?^-梦^.:。指导教师签名:备日期兴9作者联系电话:电子邮箱:广西PRRSV地方流行毒株的分离鉴定及对高免血清反应硏究摘要PRRS是流行最广

4、的接触性传染病,给全世界的养猪业带来巨大的经济HP-损失。特别是2006年来,PRRSV肆虐中国养猪业,给中国的养猪业带来巨大的创伤。广西是养猪大省,PRRSV是影响养猪业的主要病原之一V的防控至关重要。,对PRRS(1)为了了解广西PRRSV流行趋势、基因遗传变异规律,为该病的防控RT-PC民-提供理论依据132014。本研究通过方法对20年采集的广西地区各RRSV4八27地市疑似P感染的.份样品进行病原检测,阳性率为2%,说明PR民SVI-广西存在流化对检测为巧RSV

5、阳性的样品在MARC145细胞上5株-进行病毒的分离鉴定,共分离获得广西PRRSV流行毒株6。通过RTPC民方法扩增、测序31株流行毒株的NSP2基因的高变区和巧株流行毒株ORF5 ̄。31株PRRSVNSP2基因高变区序列核巧酸同源性为73.4100%基因序列,?推导编码的氨基酸同源性为83.1100%,与NCBI部分参考毒株的相应核昔44?5284 ̄酸序列同源性为1.99.%,推导编码氨基酸同源性为.99.2%,NSP2+巧—1XA1普遍存在个氨基酸缺失,缺失位置与高致病

6、性毒株J致,GXYL1403d毒株的NSP2存在124个氨基酸缺失;NSP2基因高变区核巧一3-酸遗传进化分析表明1株PRRSV均与HPPRRSV分布于同分支上,表-明31株PRRSV均为HPPRRSV。58株流行毒株ORF5基因核昔酸么间同??源性为86.4100%,推导编码的氨基酸同源性为84.5100%,与NCBI部分2?00%参考毒株的相应核昔酸序列同源性为6.91,推导编码氨基酸同源性为-56.6100%,ORF5基因核巧酸遗传进化分析表明58株PRRSV中,

7、一GXYL3这两株毒株与经典毒株VR-23321403a和GXLB140分布于同分305a、GXGG1305b、GXGG1306与7、支,GXGG1中间型毒株Em200I一HB-sh-53株与HP-PRRSV分l/2()2002等分布于同分支,其他的布于同一分支。序列分析和遗传进化分析结果说明了广西流行多为高致病性PRRSV亚型毒株,但是经典型和中间过渡型毒株仍有少量流行。(2)对N含P2和GP5序列分析有特征性的4个毒株(GXYL1403d、GXGG1305a、GX

8、GG1305b和GXGG1306)进行全基因测定、序列比较和遗传进化。结果表明,GXGG1305a、GXGG1305b、GXGG1306这3株病毒全基因为15300nt,GXYLH03d为15018nt,4株病毒全基因组核巧酸同源??.。性为96.399.6%,与参考序列的同源性为60798.1%NSP2基因氨基酸4-序列比对结果表明GXYL1403d分别在81和511635位缺失1个和123个氨基酸,这个位置的缺失是从未报道过的;GXGG1305

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