基因工程期末复习考点

《基因工程期末复习考点》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、浙江万里学院基因工程期末复习考点第一章绪论1.分子生物学与基因工程发展的代表性事件：（客观题）1928年，Griffith实验——肺炎双球菌体内转化实验，证明了转化因子（DNA）是遗传物质，没有得出蛋白质与遗传物质的关系1944年，Avery实验——体外转化实验，证实了蛋白质不是遗传物质。1952年，Hershey-Chase实验——利用放射性同位素标记大肠杆菌T2噬菌体的捣碎实验证明了遗传物质是DNA，而不是蛋白质。1953年，沃森和克里克发现了DNA双螺旋的结构，开启了分子生物学时代。威尔金斯富兰克林（填空）1958年

2、，MatthewMeselsonFranklinStahl采用氯化铯密度梯度离心法验证DNA复制的半保留复制MarshallW.NirenbergHarG.KhoranaRobertW.Holley1965年破译了所有氨基酸的密码子2.镰刀型贫血：氨基酸突变血红蛋白β—亚基N端的第六个氨基酸残基是缬氨酸（val），而不是下正常的谷氨酸残基(Glu)。3.胰岛素（公司+事件）1921年，加拿大科学家Banting和Best发现胰岛素,是糖尿病治疗史上的里程碑1922年，开始用于糖尿病的治疗胰岛素发现四人组”：Banting、

3、Best、科利普和麦克莱德1922年5月，多伦多大学与礼来公司(EliLillyandCompany)达成协议，由科学家们帮助礼来开展胰岛素的规模生产。因苏林：第一支商业化胰岛素的诞生1982年5月14日，礼来向美国FDA提交了生物合成人胰岛素NDA18-790的申请1982年10月28日，FDA发布了批准书，第一支基因重组人胰岛素正式上市1997年，第一支基因重组人胰岛素进入中国Sanger测序法：蛋白质的结构和功能是由氨基酸序列所决定的中国科学家的贡献：人工合成牛胰岛素1973年，斯坦福大学的StanleyCohen和

4、加州大学旧金山分校的HerbertBoyer合作发表了一篇学术论文——重组DNA技术4.1990年，美国批准了第一例临床基因治疗申请，患者为四岁女孩AshantideSilva，由于缺乏腺苷脱氢酶ADA基因而患有严重综合性免疫缺陷症，研究者W.F.Anderson将ADA基因导入患者的淋巴细胞，然后将经改造的淋巴细胞回输到患者体内，取得了成功。5.HIV被治愈唯一成功的例子：柏林病人6.基因编辑技术：ZFN锌指核糖核酸酶、TALEN转录激活因子样效应物核酸酶、CRISPR/Cas9第二章基因操作的工具酶1.限制性核酸内切酶

5、的作用：能在特异位点（酶切位点）上催化双链DNA分子的断裂,产生相应的限制性DNA片段切割不同来源的DNA分子将产生特征性限制性酶切图谱，具有重大应用价值（分子手术刀）2.细菌细胞内特异性降解外源核酸分子的核酸酶，其作用特点是：（知道）特异性降解异源DNA分子(甲基化修饰差异)I类限制酶随机切割双链DNA分子，II类限制酶识别、切割特殊的回文(对称)序列3.核酸工具酶分类：核酸水解酶类：核酸内切酶、核酸外切酶（填空）核酸合成酶类：DNA聚合酶、RNA聚合酶、DNA连接酶核酸修饰酶类：甲基化酶、核苷酸激酶、核苷酸转移酶、磷酸

6、酶4.常用的工具酶（客观）工具酶类功能限制性核酸内切酶特异性识别和切割DNAT4DNA连接酶生成3′-5′磷酸二酯键DNA聚合酶Ⅰ（Klenow片段）探针标记、补平3′末端反转录酶cDNA合成多聚核苷酸激酶5′磷酸化、探针标记末端脱氧核苷酰转移酶3′末端多聚尾碱性磷酸酶切除末端磷酸基TaqDNA聚合酶DNA合成、PCR5.载体的3个特点（功能元件）6.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA分子切断7.分子剪刀——限制性内切酶①分布：主要在微生物中②作用特点：专一性:一种限制酶只能识别一种特定的核

7、苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子多样性:限制酶有200多种③结果：产生黏性末端或平末端（填空）8.判断粘性还是平末端9.限制性内切核酸酶和甲基化酶一起称为限制－修饰系统10.内切核酸酶分为三类：即I型、II型、III型酶，通常所用的限制性内切核酸酶是指II型11.采用Smith和Athens提议的方案，根据限制性内切核酸酶来源和菌株命名（选择判断）a)用来源细菌的英文缩写斜体符号命名b)它的第一个字母大写，来源细菌属名的第1个字母c)第二、三字母小写，来源细菌种名的头2个字母d)第四个字母代表菌株e)最后用罗马

8、字母表示同一菌株中不同限制酶的编号Eg.HindⅢ代表从流感噬血杆菌（Haemophilusinfluenzac）d株中分离到的第3个限制酶12.不同限制性内切酶切割的三种结果:（填空）a.产生5′突出粘性末端cohesiveend（EcoRI）b.产生3′突出粘性末端（PstI、BamHⅠ）c.产生平