柱色谱与纸色谱

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1、柱色谱与纸色谱目的和要求初步掌握柱色谱和纸色谱的操作技能。柱色谱1.原理柱色谱：也叫柱层析，将混合物的溶液通过装有吸附剂的层析柱，利用吸附剂对各组分吸附能力的不同，经过洗脱剂的洗脱，将各组分分开的过程。柱色谱的操作步骤：装柱→加样→洗脱和分离→收集各组分柱色谱1.原理柱色谱分离示意图：柱色谱2.样品样品：偶氮苯和对羟基偶氮苯的混合物洗脱剂（流动相）：石油醚:丙酮=8:2（体积比）吸附剂（固定相）：中性层析氧化铝（200~300目）柱色谱3.操作步骤(1)装柱取15cm×1.5cm色谱柱一根或用25mL酸式滴定管作色谱柱，垂直放置，用25mL锥形瓶作

2、接收瓶。用玻棒将少许脱脂棉放置于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧。关闭活塞，向柱中倒入洗脱剂到约柱高的3/4处。打开活塞，控制流速约1滴/s。通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入吸附剂，用木棒轻轻敲打柱身下部，使其填装紧密，装至3/4时停止加吸附剂。待洗脱剂将干时，轻轻放少许脱脂棉到吸附剂的上方。柱色谱(2)加样待洗脱剂即将流干时，立即沿柱内壁加入约10滴已配好的混合物。当此溶液即将全部浸入吸附剂时，再用少量洗脱剂冲洗下沾在内壁和棉花上的有色物质，如此反复2~3次，至洗净为止。柱色谱(3)洗脱分离，样品收集加样完毕后，即可小心加入洗脱剂（注意一定要待有色物质全部

3、吸附于吸附剂上之后才可以加入大量的洗脱剂）。保持流出速度约1滴/s，随着洗脱剂的洗脱，可以明显看到层析柱上出现两个色带。待第一个色带快流出时，换一干净接受瓶接收这一组分的样品（哪一组分？）。纸色谱1.原理与装置纸色谱原理类似薄层色谱(a)、(b)、(c)上行纸层展开；(d)下行纸层展开纸色谱2.样品样品：L-谷氨酸；L-异亮氨酸及其混合物展开剂（流动相）：乙醇:水:冰醋酸=50:10:1（体积比）支持剂（固定相）：新华一号滤纸显色剂：2%茚三酮乙醇溶液思考题1.层析柱中若有气泡或装填不均匀，将给分离造成什么样的结果？如何避免？2.干法装柱和湿法装柱

4、的区别在于哪里？