Survivin反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的研究

《Survivin反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、天津医科大学硕士学位论文Survivin反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的研究姓名：鲁蕾申请学位级别：硕士专业：消化内科指导教师：吕宗舜20030601天f牡医科大学硬{：研究生学位'电文FBSDMSoEC}1’AMTTPBSR孙舡1640ODDDP5．FUIC50PIASODNSODNODNIRA】FCMcDNART-PCPL婶BIR英文缩略语(Ab眦viation)fbtaIbovinesofadimethylsulphosideethylenediamineteraaceticacid(3一(4，5·dimethylt

2、hiazol-yl一)2，5一diphenylterazolimbromidethiazolylbluephosphatebalancedsaltsolutionopticaldensityeisplatinfluorouracilinhibitoryeoncentritionpropidiumiodideantis．enseoligonueleotidesenseoligonucleotideoligonueleotiderateofinhibitionindexofapoptosisfloweytometercomplementar

3、yDNAreversetranscriptionpolymerasechainreactioninhibitorofapoptosisproteinbaeulovirusIAPrepeat1胎牛血消二甲基亚矾乙二胺四乙酸四甲基偶氮唑蓝磷酸盐缓冲液一种合成培养基光密度顺铂氟脲嘧啶50％半数有效浓度碘化丙啶反义寡核苷酸正义寡核苷酸寡核苷酸抑制率凋亡指数流式细胞仪互补DNA逆转录聚合酶链反应凋亡抑制蛋白杆状病毒lAP重复序列天津医科大学硕士研究生学位论文Apaf-IEPR．1CaspaSeAPCSMACFDAapoptosisactiving

4、factor-1凋亡促进因子effctorcellproteasereceptor-I效应务毗Kg蛋白酶受体一1半胱氨酸蛋白酶adeomatouspolyposiscoil结肠腺瘸息肉病挚因secord而Ddlor凼捌酾帕d舳of线粒体来源的半胱氨酸caspase蛋白酶二级活化物Foodanddrugadministration美国食品和药物管理局2天津医科太学颈士研究生学位．电文Survivin反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的研究摘要背景：肿熄是威胁我国人民健康的鬻见病、多发病。消化邀肿瘸在我国恶性肿瘤发病率及死亡率中均

5、居于首位，其中结直肠癌在我国的发病率目前呈逐年上升趋势，传统的治疗方法效果欠佳，如何有效的治疗结肠癌已成为学者专家们研究的重点。Smvivm是近年来发现的凋亡抑制蛋自家族的新成员，它可以抑制肿瘤细胞的凋亡，在近乎所有的恶性肿瘤中具有丰富的表达，而在正常组织中不表达。根据这一特性与之相关的肿瘤基因治疗成为当今研究的热点。目的：探讨研究survivin反义寡核苷酸对结肠癌细胞系HT-29的增殖，凋亡的影响，以及与化疗药的协同作用。方法：将不同浓度的survivin反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotideASODN)转染

6、结肠癌细胞HT．29，倒置显微镜观察细胞形态变化，用MTF法检测其对肿瘤细胞的抑制率(瓜)，流式细胞仪检测细胞凋亡的变化情况，免疫组化法检测ASODN转染前后survivin蛋白的表达情况，并将其与顺铂(DD甲>和氟脲嘧啶(5．Fu)联合应用，观察AsoDlN与化疗药是否具有瓠同作用。结果：SurvivinASODN在终浓度400nmol／L时，对细胞的抑制作用明显，相差显微镜下观察，结肠癌细胞HT-29细胞经ASODN转染后变天津医科大学硕{：研究生学位论文圆．漂浮，碎片形成，MTT检测ASODN对细胞的抑制率为59．5l％，与对照组

7、相比差别有显著性(P<0．05)，且6．25pg／mI的DDP或5-FU与200nmol／L的ASODN联合应用，具有协同效应(P<0．05)，另外，200nmoI／L的ASODN与小剂量化疗药仍有协同作用。免疫组化检测结果，ASODN转染后survivin蛋白表达下降。流式细胞仪检测结果发现，survivinASODN转染HT．29细胞后，其细胞凋亡指数(AI)增加，与对照组相比P<0．05。结论：结肠癌细胞系HT-29经survivin反义寡聚核苷酸转染后。survivin蛋白表达下降，细胞增殖被抑制，细胞凋亡增加，并且与化疗药具有

8、协同作用。【关键词】survivin细胞凋亡结直肠癌反义寡核苷酸4天律医科大学硕士研究生学位论文Researchontheeffectsofsurvivinantisenseoligonucleotidei