吸烟小鼠主动脉细胞凋亡、增殖及相关基因表达的研究

吸烟小鼠主动脉细胞凋亡、增殖及相关基因表达的研究

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1、华中科技大学硕士学位论文吸烟小鼠主动脉细胞凋亡、增殖及相关基因表达的研究姓名:张清伟申请学位级别:硕士专业:内科(心血管)指导教师:曾秋棠2003.4.1华中科技入学J司济医学院硕士研究生毕业论文吸烟小鼠主动脉平滑肌细胞凋亡、增殖及相关基因表达的研究华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科研究生张清伟导师曾秋棠教授中文摘要目的:研究吸烟小鼠主动脉细胞凋亡和增殖及相关基因表达的变化,从细胞生物学的角度揭示吸烟所致主动脉病变的发生机制,为可能从基因调控着手干预吸烟所致动脉病变提供基础实验依据。方法:实验以小鼠作研究对象,首先用自行设计的小鼠烟雾吸入方

2、法建立不同阶段小鼠吸烟模型,并设立正常不吸烟对照组,然后利用脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(吼琳EL)技术,增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色对吸烟小鼠主动脉平滑肌细胞凋亡和增殖进行检测,同时定性观察上皮细胞凋亡情况及形态学变化,运用免疫组织化学染色技术检测平滑肌细胞凋亡相关基因Bel.2、e-mye的表达。/结果:正常不吸烟对照组小鼠主动脉内几乎见不到凋亡细胞和增殖细胞,l、血管内膜光滑,Bcl一2、c.myc有少量表达。吸烟4周时小鼠主动脉内平滑肌细胞凋亡和增殖显著增多,内皮也观察到凋亡细胞,Bcl.2、c-myc

3、表达显著增加。吸烟8周时.平滑肌细胞凋亡和增殖仍较活跃,但和吸烟4周时比较无显著差异.此时看到有上皮细胞凋亡,上皮破坏,增殖平滑肌细胞向内皮迁移,Bel一2、c-mye表达和4周时比较无显著差异。吸烟12周时平滑肌细胞凋亡和增殖更加活跃.尤以平滑肌细胞增殖为著,上皮破坏严华中科技大学唰济医学院硕士研究生毕业论文重,内膜不规则,Bcl一2表达稍增高,c—myc表达显著提高。结论:实验显示,吸烟可引起小鼠主动脉细胞凋亡,吸烟小鼠主动脉内不仅存在平滑肌细胞凋亡而且存在平滑肌细胞增殖。随吸烟时间延长.平滑肌细胞增殖占优势。Bcl-2、c.myc的表达在吸

4、烟小鼠主动脉平滑肌细胞凋亡中起调控作用。翼,词吸多一胞箩;髓细吵2主夥H爹;耳-。,)6.flll。。×√/y√华中科技大学同济医学院硕—L研究生毕业论义TheStudyofApoptosis、ProliferationandExpressionofRelatedGenesofAorticSmoothMuscleCellinSmo“ngMiceInstituteofcardiovasculardisease,TongjimedicalcollegeHuazhonguniversityofscienceandtechnologyPostgradua

5、teZhangQingweiTutorProf.ZengQiutangAbstractObjectiveTostudythechangesofapoptosis、proliferationandtheexpressionofrelatedgenesofaorticsmoothmusclecellinsmokingmice,ToExplorethemechanismofmedalpathologicalchangesforsmokingfromcytobiology.AndthiscouldProvidethebasicevidenceforcur

6、ingarterialpathologicalchangescausedbysmokingfromregulatingthegenes.MethodsEstablishedthemodelofsmokingmicewithdifferentstages,TUNELtechniqueandPCNAimmuno-histoehemicalstainingwereusedtoexaminethepercentageofpositivecellsofapoptoticcells、proliferatingcellsinaorticsmoothmuscle

7、ofsmokingmice.Meanwhile,themorphologicalchangesin.theepithelialcellsobservedbymicroscopeandimmuno·histochemicalstainingwasusedtoexaminetherelatedgenesBcl·2、c-mycofapoptosisinsmoothmuscle.ResultsFewapoptoticcellsandproliferatingcellswerefoundinnormalaortaofnosmokingmice.Alittl

8、eofexpressionofBcl一2、c·mycwasfoundinsmoothmusclecellsofnormalaorta.T

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