鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株的致弱研究

《鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株的致弱研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、东北农业大学硕士学位论文鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株的致弱研究姓名：曾祥伟申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：魏萍;王笑梅2003.5.1摘要摘要本研究瞻中国一欧盟合作项目(ERBICl8CT980330)：“鸡传染性法氏囊病的流行病学、病毒基础及疫苗的改进”的一部分J’目的在于通过对按OIE及欧盟标准分离鉴定的中国vvlBDV-GX株的致弱研究来捣示鸡传染性法氏囊病超强毒毒力的分子基础。，f本研究成功将鸡传染性法氏囊病超强毒vvlBDVgx株通过SPF鸡胚的快速培育及鸡胚成纤维细胞传代致弱，揭示了vvlBDV超强毒向弱毒转化过程中

2、，主要结构蛋白VP2基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变化规律。对不同代次细胞毒进行了序列分析．发现细胞毒在第7代以前，VP2基因序列没有改变，与欧洲标准超强毒氨基酸同源性达100％；细胞毒第8代，有个别核苷酸发生了改变，但氨基酸序列没有改变；细胞毒第9代是变化复杂的一代：10代毒VP2基因与欧洲标准弱毒Cu-I氨基酸序列同源性达97％：以后的细胞适应毒至20代，其VP2基因序列不再改变。致病性实验表明原代毒对4周龄SPF鸡致死率为64％，细胞5代毒仍具有超强毒的特征，接种4周龄SPF鸡，死亡率仍达60％：而i5，20代毒对鸡无致病性，20代毒

3、在鸡体内连续传代6代不返强。>√我们对细胞毒第9代(CEF-9)的分子生物学及生物学特性进行了研究，结果表明其VP2基因序列既具有超强毒的特征，又兼有部分致弱毒的特征，其致病性介于超强毒株和致gB株之间；在体内外均不稳定，体外继续传代可继续致弱，回归体内可迅速返强。这说明CEF-9是wIBDV驯化过程中，毒力强弱转化的中间过渡形式。本研究证明，超强毒经过培育，可以由超强毒株演变成不稳定的中间株，再继续演变成稳定的致弱株。此研究为IBDV毒力变异规律的深入研究打下了物质和理论基础。关键词：厂钰，b，觥黼溉囊弩熬叫舶,V彬P2期，抖胁一，制”⋯

4、：／V东北农业大学农学硕士学位论文StudiesontheattenuationofvvlBDVGXstrainAbstractThisresearchisallmaportantpartofINCO-DCProject(ERBICl8CT980330)named“AcutehafectiousBursalDiseaseinPoultry：EpiderniologyoftheDisease，BasisofVirulenceandImprovementofVaccination”．OnestrainW113DVwasisolatedandid

5、entifiedfromchinaaccordingwithEuropeanandOIEstandard．Thispartresearchalmsatseekingthevirulencemarkerofveryvirulentinfectiousbursaldiseasevirus(vvIBDV)inmoleculelevelthroughtheattenuationstudy．VvlBDVGxstrainwithhighpathogenicitywasattenuatedthrou曲replicatinginSPFembryoandCE

6、Fsuccessfully．ThechangepatternofVP2nucleotideandthededucedaminoacidsequenceswereobtainedfromthisstrainofwIBDVtoattenuatedoneduringtheprocessofattenuationnleresultsofsequencing．analyzingofeverygenerationvirusesshowedthatthereWasnotanychangesOnVP2genebeforeCEF一7generation，th

7、ereWasafewchangesinVP2genebutnotonaminoacidatCEF一8generation，t11ehomologyofaminoacidsequencewithEuropeanreferencewIBDVstrainWasupto100％；ThevirusofCEF一9generationWasanintermediatewithcomplexchanges．CEF-10generationhadbecomecell．adaptedstrain．thehomologyofaminoacidsequencewi

8、tllEuropeanreferenceIBDVattenuatedstrainCu．1wasupto97％．VP2genedidnotchangedanymorefromCEF