醋酸高产菌株选育及其代谢调控研究

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1、单位代码：10359密级：公开学号：2015111078分类号：TS264.2HefeiUniversityofTechnology硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION（学术硕士）论文题目：醋酸高产菌株选育及其代谢调控研究学科专业：食品科学作者姓名：姚洪礼导师姓名：吴学凤副教授完成时间：2018年4月合肥工业大学学历硕士学位论文醋酸高产菌株选育及其代谢调控研究作者姓名：姚洪礼指导教师：吴学凤副教授学科专业：食品科学研究方向：食品微生物2018年4月ADissertationSubmittedfortheDegre

2、eofMasterResearchonBreedingofHighAceticAcidProducingStrainanditsMetabolismControllingByYaoHongliHefeiUniversityofTechnologyHefei,Anhui,P.R.ChinaApril,2018致谢光阴荏苒，岁月如梭，辛勤而又充实的研究生生涯即将结束，数易其稿，字斟句酌，毕业论文的撰写也接近尾声。回首三年求学路上的点点滴滴，无论是论文的选题开题，还是实验的进展及论文的撰写，都离不开恩师的指导、同学的帮助及家人的支持，

3、在此向您们特表感谢！本论文是在吴学凤老师的悉心指导下完成的，吴学凤老师不仅在学习和生活以及科学研究上给予我莫大的帮助，还教会了我很多做人做事的道理，衷心感谢吴老师一直以来对我谆谆教导及无微不至的关怀。忘不了您的朴实无华的人格魅力、平易近人的处世态度；忘不了您的孜孜不倦的钻研精神、苦口婆心的劝说教导；忘不了您的勤劳务实的工作态度、因材施教的教学方法。三年来，是您在我迷惑不解时给我指点迷津，是您在我科研失败时给我指导安慰，是您在我生活所困时给我支持和希望！衷心感谢李兴江老师长期以来对我的帮助与支持，从论文的选题、开题、实验的进展以及

4、论文的撰写与发表，李兴江老师都给予了我莫大的关心和支持，无论是学习、生活还是科研的态度，您始终是我心中的榜样，是我将感谢一生的良师益友。衷心感谢姜绍通老师、潘利军老师、郑志老师、蔡克周老师、赵妍嫣老师、操丽丽老师、庞敏老师、罗水忠老师、杨培周老师、穆冬冬老师这三年来对我的指导与帮助，让我的研究生生涯在一个和谐友爱的课题组中度过。衷心感谢实验室师兄李顺，师姐孙婷、汪海涛，师妹刘青、王巧云及师弟李传运在学习和科研中给予我的帮助！衷心感谢同课题组的邓永东、水龙龙、彭晔、朱星星、王淑敏、曹凤红给予我帮助，在此，祝福你们在未来人生路上一帆

5、风顺!衷心感谢我的室友陈博、王煜、高杰，大千世界而我们却能欢聚一室，建立亲密的友谊，让我在愉快、温馨的环境下顺利完成我的硕士论文。衷心感谢我的家人，感谢你们多年以来对我的支持、鼓励和陪伴，感谢你们一直以来对我的照顾和关心，你们的健康和快乐是我最大的心愿！作者：姚洪礼2018年01月16I摘要醋酸是食醋的主要成分，广泛用于醋酸纤维、醋酐、醋酸乙烯、金属醋酸盐等化工业，在食品工业中用作酸化剂、增香剂和香料等。醋酸生产方法很多，但用于食品行业的醋酸只能使用生物法生产。巴氏醋酸菌（Acetobacterpasteurianus）一直是我

6、国食醋发酵的主要菌种，但是该菌种涉及具体菌株多，产酸能力强的优势菌株极少，且菌株性能不稳定。为提高醋酸发酵能力，获得优势菌株，本研究从几株常用醋酸菌中选出了一株生长状况较好且产酸强度高的菌株（AcetobacterpasteurianusBJST-S）；对该菌株进行紫外诱变，选育出一株优良醋酸菌YHL3；结合其发酵特性及代谢通量分析，探讨其诱变机制；对其进行关键酶活代谢调控；并优化醋酸菌YHL3半连续罐发酵工艺参数，建立了高浓度醋酸发酵体系。主要研究结果如下：（1）优良醋酸菌的选育。通过对比三个菌株的发酵特性，确定了巴氏醋杆菌B

7、JST-S为优势菌株，其最高产总酸量为60.15g/L；并对其进行诱变选育、高醇压力培养，选出在高醇压力下总酸产量最高（42.55±0.86g/L）的菌株，命名为AcetobacterpasteurianusYHL3；利用该菌株，进行5次传代培养和发酵实验，每批发酵48h，产酸量维持在58.10~59.68g/L，发酵强度维持在1.21~1.24g/(L·h)。（2）诱变机理研究。对醋酸菌YHL3与BJST-S进行耐受性对比试验结果表明，在高醇下，YHL3的乙醇脱氢酶（ADH）和乙醛脱氢酶（ALDH）比酶活最大值分别为5.96±

8、0.26U/mg和4.82±0.22U/mg均高于BJST-S的ADH和ALDH比酶活（分别为4.78±0.28U/mg和4.12±0.24U/mg）；在底酸下，YHL3的ADH和ALDH比酶活最大值分别为6.08±0.18U/mg和5.47±0.16U/mg均