LAMP检测综述-戴婷婷

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1、环介导等温扩增技术的应用研究进展戴婷婷1，陆辰晨2，郑小波2（1南方现代林业协同创新中心，南京林业大学林学院，江苏南京210037；2南京农业大学植物保护学院，江苏南京210095；）摘要：环介导等温扩增技术（Loop–mediatedisothermalamplification，LAMP）采用特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在等温条件（60℃~65℃）下60min左右进行核酸扩增，其扩增效率可达到109~1010个数量级，具有特异性强、灵敏度高、等温、操作简单和检测结果快速等优点，已广泛应用于病毒、细菌、寄生虫、菌物等

2、病原物的检测中。本文对LAMP技术原理及其在病原物检测中的应用做了简要综述。关键词：环介导等温扩增技术；应用；检测；病原物中图分类号：文献标志码：文章编号：ApplicationResearchProgressOfLoop-MediatedIsothermalAmplificationDAITing-ting1;LUChen-chen2;ZHENGXiao-bo2(1SouthernChinaCollaborativeInnovationCenterofSustainableForestry,CollegeofForestry,NanjingForestryU

3、niversity,Nanjing,Jiangsu210037,China；2CollegeofPlantProtection,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)Abstract：AnewmethodofgeneamplificationcalledLoop-mediatedisothermalamplification(LAMP)hasbeendevelopedinrecentyears.LAMPassaypossesscharacteristicofsimpleness,fleetnessa

4、ndhighspecificity.Thewholeprocedureisverysimpleandrapidwhichcanbecompletedinlessthan80minunderisothermalconditionsemployingasetofsixspeciallydesignedprimersofatargetgene,byincubatingallthereagentsinasingletube.LAMPdoesnotrequireathermalcyclerandcanbeperformedsimplywithaheatingblocko

5、rwaterbath.Consideringtheadvantagsofrapidamplification,simpleoperationandeasydetection,LAMPhaspotentialapplicationsfordiagnosisaswellassurveillanceofinfectiousdiseasesindevelopingcountrieswithoutrequiringsophisticatedequipmentorskilledpersonnel.LAMPhasbeenwidelyappliedtothedetectiono

6、fsuchpathogensasvirus，bacteria,parasite,fungietc.ThisarticlesummarizedtheprincipleofLAMP，andtheapplicationindetectionofpathogenicmicroorganisms.KEYWORDS：Loop-mediatedisothermalamplification;application;detection;pathogenicmicroorganisms核酸扩增技术是分子生物学领域的一项重要的研究手段，核酸扩增技术主要包括常规PCR为基础的变温扩

7、增技术以及等温扩增技术两大类。目前，变温扩增技术主要包括普通PCR、巢式PCR、多重PCR、实时荧光定量PCR等，这些技术在病原微生物的检测中发挥着重要的作用。由于核酸的变温扩增技术需要精密变温设备和高级复杂的分析仪器，或者对操作人员的熟练度和专业水平要求比较高，且反应时间长，不利于在基层推广；而病原菌的防控关键在于对病原微生物的快速、准确、及早的检测并确诊。因此，建立一种快速、准确的新型的等温扩增技术对于植物病原物的检测显得尤为重要。等温扩增成为核酸扩增技术的一个研究热点，环介导等温扩增技术就是其中的一种。环介导等温扩增技术是日本学者Notomi[1]等建立

8、了一种新的核酸等温扩增技术。自LAMP