高产酸性蛋白酶菌株的筛选及发酵条件研究

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1、万方数据食品与发酵科技FoodandFermentationTechnology第46卷(第6期)Vo正46，No．6吉j2同／酸性蛋白酶菌株的筛选及发酵条件研究沈玉洁1，张明春2，向苇2，方尚玲1，陈茂彬1．(1．发酵工程省部共建教育部重点实验室，湖北工业大学生物工程学院，湖北武汉4300682．湖北白云边酒业股份有限公司，湖北松滋434200)摘要：从白云边高温大曲中筛选得到1株产酸性蛋白酶活力较高的芽孢杆菌菌株，经VI’rEK-32微生物自动鉴定系统鉴定为地衣芽孢杆菌。通过对该茵株固体发酵条件的研究，发现其最适产酶条件为：最佳固体培养基为：固料：水为1：0．7，在固料中麸皮：黄豆

2、粉为1：0．8，pH5．0，培养温度为45℃，发酵时间为52h，接种量为7％，该菌株固体发酵产酶活力达到1420．2U，g。关键词：高温大曲；酸性蛋白酶；发酵条件中图分类号：Q939—3TS261．1TQ925．2文献标识码：A文章编号：1674—506X(2010)06_0032-0004Screeningofacid-proteasestrainandstudyonitsfermentationconditionSHENYu-jiel，ZHANGMing—ehun2，XIANGWei2,FANGShang—lin91，CHENMao-binpf1．KeyLabofFermentat

3、ionEngineering(Min蠡tryofEducation),CollegeofBioengineering,HubeiUniversityofTechnology,Wuhaa,Hubei430068，China；2．HubeiBaiyunbianLiquorIndustryCo．Ltd．，Songzi,Hubei434200；)Abstract：Aacidproteaseproducingstrainw船fromhiishtemperatureDaquWaSidentified鹳BacilluslicheniformiswithVITEK-32microbeautomatic

4、appraisalsystem．Accordingtothestudyoffermentationcondition，wecanfinditsfittestconditionwereasbllows：theoptimumcompositionofthesolidsubstrateforfermentationWaSsolidmaterial：waterwas1：0．7，bran：beanflourwas1：O．8inthetotalsolidmatedal，initialpHis5．0，culturetemperatureis45℃，fermentationtimeis52h。7％fl

5、askinoculumssize．Underaboveconditions，theactivityofacid—proteaseproducedbythestrainWaS1420．2U／g．Keywords：hightemperatureDaqu；acid-protease；fermentationconditiondoi：10．39690．issn．1674-506X．2010．06-010白酒大曲中含有酸性蛋白酶，其在pH值为2．0—5．0的酸性条件下活力最强。在白酒生产过程中，高级醇主要来源于酸性蛋白酶分解蛋白质所生成的氨基酸，酸性蛋白酶与白酒制曲、酒醅发酵以及白酒中香味物质的

6、形成有着密切的关系。研究发现嗜热芽孢杆菌有极强的酸性蛋白酶活性，且随着品温上升而增长，可以认为它是酱香型高温大曲生成酸性蛋白酶的主力军【11，所以在白酒发酵中对于蛋白酶作用的研究意义重大。本试验采用平板初筛和三角瓶复筛得到1株产酸性蛋白酶活力较高的菌株，通过对其发酵条件的研究，进一步了解其生物活性，为后续产酱香机理的研究提供理论基础，同时也为生产实践提供一定的科学依据。1材料与方法1．1菌株从白云边高温大曲中预先筛选得到的5株耐高温菌株1．2培养基收稿日期：2010—09—21基金项目：国家自然科学基金项目“嗜热芽胞杆菌转座子突变体库的构建及产香机理研究”(31071594)资助。作者

7、简介：沈玉洁(1985一)，女，硕士研究生，研究方向：工业微生物。通讯作者：陈茂彬，博士，教授，主要从事工业微生物、酿酒生物技术研究。万方数据第46卷(怒第160期)沈玉洁等：高产酸性蛋白酶菌株的筛选及发酵条件研究331．2．1分离培养基：采用牛肉膏蛋白胨培养基及种子培养基[211．2．2酸性蛋白酶初筛培养基干酪素0．4％，KH2P040．03％，MgS04"7H200．05％，FeS04·7H20o．01002％，NaCl0．1％，ZnS04