《核酸检测培训》PPT课件

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1、病毒种类ELISA检测项目窗口期窗口期检测率国家或地区HBVHCVHIV核酸检测在临床诊断中的应用Ø单链DNA形成双链的原则—碱基互补配对:G-CT-A核酸在体内的复制DNA受热,会解开双链互补状态,形成单链;降温会恢复双链状态核酸检测的一般流程Ø核酸样品的制备:从血液、体液、组织中提取或PCR扩增Ø样品的检测:核酸杂交、PCR、荧光定量PCR、PCR-ELISA等Ø结果判读:电泳、膜、荧光定量PCR仪等PCR核酸提取扩增杂交显色结果判读探针点膜交联Ø聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction),简称PCR,是

2、一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。ØDNA的复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。PCR的产生探针特点SYBR双探针分子引物特异TaqmanGREEN杂交信标探针性质可逆荧光积累荧光熔点分析能不能

3、引物(非引物(非特特异性扩引物+引物引物异性扩增或特异性增或引物2探针+探针+探针引物二聚体二聚体有有影响)影响)探针无有有有无通用性通用专用专用专用专用使用技术使用仪器HBV、HIV、HCV、PCR荧光探针法荧光定量PCR仪HPV、TB、HCMV、淋球菌、解脲脲原体、PCR仪肺炎支原体、沙眼衣原体、单纯疱疹病毒Ⅱ型、PCR-反向点杂ɑ-地中海贫血、缺失交法型β-地中海贫血、淋球菌、血筛试剂HBV、HCV、新型冠PCR荧光探针法荧光定量PCR仪状病毒、血筛试剂PCR-酶免酶免相关仪器HBV、HIV、HPV、TB、PCR荧光探针法荧

4、光定量PCR仪HCV、沙眼衣原体、新型冠状病毒HBV、HCV、TB、PCR荧光探针法荧光定量PCR仪沙眼衣原体、新型冠状病毒HBV、TB、HPVPCR荧光探针法荧光定量PCR仪凯普、港龙以HPV检测为主。浩源血筛试剂已进入审批阶段。罗氏、生物梅里埃公司有HIV检测试剂盒,均以各自公司的专利技术为主研发。

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