《蛋白质的化学》课件

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1、第四章蛋白质的化学预习重点：1.蛋白质的功能2.氨基酸组成、分类、两性解离3.氨基酸的分离分析4.蛋白质的一级结构、肽键和肽链5.维持蛋白质构象的化学键6.蛋白质的二级结构7.蛋白质的结构与功能学习难点：1.谷胱甘肽2.蛋白质一级结构的测定3.基序、三级结构、四级结构4.蛋白质合成基本原理5.蛋白质的性质6.蛋白质分离纯化7.蛋白质纯度鉴定第一节蛋白质是生命的物质基础一、蛋白质是构成生物体的基本成分二、蛋白质具有多样性的生物学功能生物催化作用（酶）代谢调节作用（激素）免疫保护作用（抗体）转运和贮存作用（血红蛋白)运动与支持作用（肌动蛋

2、白、胶原蛋白）控制生长和分化作用（核蛋白）接受和传递信息作用（受体蛋白）生物膜的功能第二节蛋白质的化学组成各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％。100克样品中蛋白质的含量(g%)====每克样品含氮克数×6.25×100凯氏定氮法测定蛋白质含量:定氮仪一.蛋白质的元素组成：二、蛋白质结构的基本单位──氨基酸组成蛋白质的氨基酸共有20种，称为基本氨基酸。（一）基本氨基酸的结构通式CαHCOOHRH2N不同的α-氨基酸，其R侧链不同除甘氨酸、脯氨酸外，基本氨基酸皆为L-α-氨基酸。20种氨基酸的分类：根据R基不同，分为4类甘氨酸glyc

3、ineGlyG5.97丙氨酸alanineAlaA6.00缬氨酸valineValV5.96亮氨酸leucineLeuL5.98异亮氨酸isoleucineIleI6.02苯丙氨酸phenylalaninePheP5.48脯氨酸prolineProP6.301、非极性疏水性氨基酸2色氨酸tryptophanTryW5.89丝氨酸serineSerS5.68酪氨酸tyrosineTryY5.66半胱氨酸cysteineCysC5.07蛋氨酸methionineMetM5.74天冬酰胺asparagineAsnN5.41谷氨酰胺gluta

4、mineGlnQ5.65苏氨酸threonineThrT5.602、极性中性氨基酸天冬氨酸asparticacidAspD2.97谷氨酸glutamicacidGluE3.22赖氨酸lysineLysK9.74精氨酸arginineArgR10.76组氨酸histidineHisH7.593、酸性氨基酸4、碱性氨基酸（三）、氨基酸的化学性质①两性解离与等电点②紫外吸收性质③茚三酮反应①.两性解离氨基酸在水溶液和晶体状态主要以兼性离子形式存在CHRCOO－H3N+等电点的定义：当溶液处于某一pH值时，氨基酸分子中所含的-NH3+和-CO

5、O-数目正好相等，净电荷为0。这一pH值即为氨基酸的等电点，简称pI。每种氨基酸都有特定的等电点。在等电点时，氨基酸的溶解度最小。等电点COO－CHH3N+R+OH－+H+COO－CHH2NR+OH－+H+在酸性溶液中（pH＜pI）在水溶液中（pH=pI）在碱性溶液中（pH＞pI）COOHCHH2NR溶液pH影响氨基酸的羧基与氨基的解离程度COO－CHH3N+CH3K1COOHCHH3N+CH3COO－H2NCH3K2Ala+Ala±Ala－HCCOOHCHH3N+CH2COOHCOO－CHH3N+CH2COOHCOO－CHH2NCH

6、2COO－Asp+Asp±Asp－Asp=K1K2K3CCCH2COON+3HOO－H举例：－②.紫外吸收在紫外区酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸光能力。苯丙氨酸的max＝259nm酪氨酸的max＝278nm色氨酸的max＝279nm蛋白质中含有这些芳香族氨基酸，所以也有紫外吸收能力。一般用紫外分光光度计在280nm波长下测定最大光吸收，而测定蛋白质的含量。③.茚三酮的反应A.该反应非常灵敏，测定范围：0.5~50µg/mlB.氨基酸与茚三酮，生成的蓝紫色化合物，在570nm测定吸光值C.脯氨酸、羟脯氨酸与茚三酮生成黄色物质，在44

7、0nm处测吸光值应用：A.氨基酸定量分析（纸层析法或者薄膜层析法分离）B.氨基酸自动分析仪氨基酸的分离与分析自动氨基酸分析仪1.蛋白质完全酸水解2.水解液于PH2上样于钠型阳离子交换柱3.用PH3.50.2mol/L柠檬酸钠溶液洗脱4.用PH4.250.2mol/L柠檬酸钠溶液洗脱5.分析洗脱谱上各峰的位置和面积，与标准氨基酸图谱比较分析P66★第三节蛋白质的分子结构一级结构（决定空间结构）：又叫共价结构或基本结构，指蛋白质中不同氨基酸的种类、数量和排列顺序。（构象）空间结构二级结构三级结构四级结构基序结构域（决定功能）+-HOHNH

8、2-CH-C-N-CH-COOHR2HR1ONH2-CH-CR1OOHNH-CH-CR2OOHH肽键由一分子氨基酸的α羧基和另一分子氨基酸α氨基缩合脱水而成。概念：肽、二肽、寡肽、多肽、多肽链H2NCNCCOOHRnHH