肿瘤细胞表达GRP78的分析

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1、目录英文缩略词表………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………2ABSTRACT………………………………………………………..3前言………………………………………………………………..4正文材料和方法……………………………………………………….5结果……………………………………………………………10讨论……………………………………………………………19小结……………………………………………………………21综述………………………………………………………………..22热休克蛋白在炎症和免疫中的作用………………………….

2、..22参考文献………………………………………………………...28致谢………………………………………………………………..33华中科技大学硕士学位论文英文缩略词表BiPtheimmunoglobulinheavybindingprotein免疫球蛋白重链结合蛋白BMDCsBonemarrowderivedcells骨髓来源细胞CCLchemokinefamily趋化因子FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素CSFcolonystimulatingfactor集落刺激因子GRP78glucoseregulatedprotein78k

3、D葡萄糖调节蛋白78HRPHorseradishPeroxidase辣根过氧化物酶HSPHeatshockproterns热休克蛋白ILinterleukin白细胞介素LPSlipopolysaccharide脂多糖MHCmajorhistocompatibilitycomplex主要组织相容性复合体PBMCperipheralbloodmononuclearcell外周血单个核细胞PBSPhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲液TGFtransforminggrowthfactor转化生长因子TNFtumornecrosisfactor肿瘤坏死因子

4、1华中科技大学硕士学位论文肿瘤细胞表达GRP78的研究硕士研究生：唐友发导师：雷萍副教授沈关心教授中文摘要【目的】确定GRP78在肿瘤细胞及培养上清中的表达并初步探究其在炎症反应中的作用【方法】体外培养多种肿瘤细胞，WesternBlot检测GRP78在细胞总蛋白中的表达；流式细胞术检测GRP78在细胞膜上的表达；ELISA检测GRP78在细胞培养上清中的表达；激光共聚焦检测GRP78在细胞中的定位；Griess法检测GRP78对小鼠骨髓来源的细胞分泌NO的影响。【结果】GRP78在多种肿瘤细胞的总蛋白中、细胞膜上、培养上清中均有表达，并且GRP78表达水平在LO2

5、和HepG2中没有统计学差异；衣霉素可诱导乳腺癌细胞MCF-7总蛋白和培养上清中GRP78表达增加。在LPS刺激时，鼠源性重组GRP78处理BMDCs比起未处理组有更低水平NO分泌。【结论】GRP78在细胞核、胞浆、胞膜和培养上清中都有表达并且并且GRP78表达水平在LO2和HepG2中没有统计学差异；在应激时总蛋白和培养上清GRP78表达增加；GRP78可以降低BMDCs对LPS刺激产生NO的能力。【关键词】葡萄糖调节蛋白78；炎症；脂多糖；一氧化氮；肿瘤2华中科技大学硕士学位论文ExpressionanddistributionofGRP78intumorcel

6、lsMasterCandidate:SunXiaoxuSupervisor：LeipingShengguanxinABSTRACTObjective:ToinvestigatetheexpressionofGRP78intumorcellsandpreliminarilyprobeitsroleininflammation.Methed:ThedistributionofGRP78inthecellwasdetectedbyWesternblotandflowcytometry.ThesecretedGRP78wasdeterminedbyELISA.NOinthe

7、surpernatantwasdetectedbyGriessreagent.Results:ExpressionofGRP78couldbedetectedinthecytoplasm,nuclear，cellmembraneandsupernatant.TheexpressionlevelofGRP78inLO2cellsshowednostatisticaldifferencewiththoseofHepG2cells.ExpressionofGRP78wasincreasedwhentheMCF-7cellswasstimulatedbytunicamy