新编生物化学实验课义

《新编生物化学实验课义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、新编生物化学实验讲义谢宁昌刘洋王桂兰班级学号姓名目录页码生化实验安排2实验一.粗脂肪的定量测定---索氏（SOXhlet）提取法3实验二.氨基酸的分离鉴定---纸层析法5实验三.血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳7实验四.蛋白质的定量测定---微量克氏（Kjeldahl）定氮法8实验五.紫外吸收法测定核酸的含量12实验六.酶活力测定14实验七.血糖的定量测定---Hagedorn-Juensen定糖法17实验八.米氏常数(Km)和最大反应速度(Vm)的测定19实验九.酶促反应进程曲线的制作和初速度的测定2325生化实验室开放规则实验计划专业学时数人数应做实验地点：实验大楼404实验室生物工程

2、401901-9制药工程201361、3、5、6、7药物制剂301061、2、3、5、6、7、8实验内容和管理实验员序号123456789实验名称粗脂肪的定量测定-索氏提取法氨基酸的分离鉴定-纸层析法血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳蛋白质的定量测定-微量克氏定氮法紫外吸收法测定核酸的含量酶的活力测定血糖的定量测定米氏方程的确定酶促反应进程曲线的制作和初速度的测定耗时（hr）464644444专业生工药剂制药生工药剂生工药剂制药生工生工药剂制药生工药剂制药生工药剂制药生工药剂生工操作台（个）848488844管理实验员王浩琦/王习霞王桂兰/唐开华王桂兰/唐开华王浩琦/王习霞刘洋/曹慧君刘洋/

3、曹慧君王浩琦/王习霞刘洋/曹慧君刘洋/曹慧君生化实验室的开放时间表时间节星期一星期二星期三星期四星期五上午1-24-16周开放6hr/日8:45±10分钟必须到实验室报到3-44-16周开放6hr/日10:15±10分钟必须到实验室报到中午午休下午5-64-16周开放6hr/日13:30±10分钟必须到实验室报到4-16周开放6hr/日13:30±10分钟必须到实验室报到7-84-16周开放6hr/日13:30～15:30必须到实验室报到4-16周开放6hr/日14:15±10分钟必须到实验室报到4-16周开放6hr/日13:30～15:30必须到实验室报到晚饭晚上9-1011-1

4、2加班人员单周唐开华/夏荣慧/顾永明王浩绮/张玲/贺忠王桂兰/张玲/周治曹慧君/夏荣慧/梅艳珍刘洋/张玲/王卫国双周王桂兰/夏荣慧/周治王浩绮/张玲/贺忠唐开华/张玲/顾永明刘洋/夏荣慧/王卫国曹慧君/张玲/梅艳珍规则1.同学们应至少提前2天到实验室预定或修改要做的实验，以便实验员做好准备，请大家务必不要按照讲课的顺序选实验，只要根据讲义和实验软件预习好了，就可来选做。实验大楼429实验室是多媒体实验室，为同学们准备好了生化实验讲义和生化实验软件，全天开放，欢迎大家前来预习。希望同学们尽量靠前安排做实验，不要拖到学期末。2.一旦预定好了实验，就得守时，不许缺席，不许迟到，以免造成试

5、剂浪费和影响下一轮同学做实验。请同学们务必在规定的时间内到实验室找管理实验员报到。报到时请出示预习报告，以便做完实验填上数据后立即交上。3.实验前请注意看一下黑板的提示以及实验室内的有关标语。4.实验1、3、5、6、7可各自同时开放8个操作台，实验2、4、8、9可各自同时开放4个操作台，每个操作台可容1组人做实验，每组1人。25实验一.粗脂肪的定量测定——索氏（SOXhlet）提取法目的和要求学习和掌握脂肪提取的原理和测定方法。熟悉和掌握重量分析的基本操作。原理本法为重量法。用脂肪溶剂将脂肪提取后进行称量。该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂，如乙醚或沸点为30℃至60

6、℃的石油醚，借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂溶性物质为脂肪类物质的混合物，其中含有脂肪、游离脂肪酸、磷脂、糖脂、固醇、芳香油、某些色素及有机酸等，称为粗脂肪。用该法测定样品含油量时，通常采用沸点低于50℃的有机溶剂作为脂肪溶剂。此时，样品中结合状态的脂类(主要是脂蛋白)不能直接提取出来。所以该法又称为游离脂类定量测定的方法。样品的准备称取样品的重量根据材料中脂肪的含量而定（参考表1-1）。通常脂肪含量在10%以下的，称取样品10-20克。脂肪含量为50-60%的，则称取样品2-4克。表1-1几种干的植物种子和种仁中油脂的百分含量样品含油量%样品含油量%向日葵种籽向日葵种

7、仁蓖麻种籽蓖麻种仁芝麻种籽油菜种籽花生种仁23.5-45.040.0-67.845.1-58.550.7-72.046.2-61.041.1-42.940.2-60.7大豆种籽油桐种仁玉米谷粒小麦谷粒稻子谷粒豌豆种籽10.0-25.047.8-68.93.0-9.01.6-2.61.3-2.40.7-1.9将样品在80℃-100℃电热鼓风干燥箱内烘去水分，一般烘4小时，烘干时要避免过热。样品颗粒不宜太大，一般要在研钵中研碎样品。样品若是液体，应将一定体积的样品滴在滤纸