微生物检验第八章非发酵阴杆

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1、第十七章非发酵革兰阴性杆菌是指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧,无芽胞的革兰阴性杆菌。特别提示:并非分类概念只为认识方便生物习性相似已经形成习惯革兰阴性杆菌OX+葡萄糖O/F葡萄糖O/F不动杆菌属窄食单胞菌属不利用洛非不动杆菌FO肠杆菌科假单胞菌属无色杆菌属金色杆菌属不利用产碱杆菌布鲁菌属产碱假单胞无色杆菌FO气单胞邻单胞弧菌属-共有的几个特点非发酵菌大多数为条件致病菌主要引起抵抗力低下病人的机会感染,如败血症、呼吸道感染、尿路感染、伤口感染等。现已成为引起医院内感染的主要病原菌。对抗生素有天然的抗药性非发酵菌对抗生素常呈现多重耐药现象。如铜绿假单胞菌、嗜麦芽

2、窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、黄杆菌等对绝大多数抗生素耐药,铜绿假单胞菌对氨苄青霉素耐药率达100%,甚至对第三代头子孢菌素也呈现耐药,而且耐药率在逐年增加。不发酵革兰阴性杆菌分类假单胞菌属(Pseudomonas)产碱杆菌属(Alcaligenes)不动杆菌属(Acinetobacter)莫拉菌属(Moraxella)无色杆菌属(Achromobacter)金氏杆菌属(Kingella)黄杆菌属(Flavobacterium)艾肯菌属(Eikenella)土壤杆菌属(Agrobacterium)黄单胞菌属(Xanthomonas)丛毛单胞菌属(Comamonas)常见非发酵革兰

3、阴性杆菌的初步分群鉴定试验假单胞菌属无色杆菌属黄杆菌属不动杆菌属产碱杆菌属丛毛菌属莫拉菌属氧化酶+++/--+++/-O/F试验O/-OOO/----动力+/-+/-+/--++-注:+:90%以上阳性;-10%以下的阳性;+/-:约70%为阳性;O:为氧化。非发酵菌嗜麦芽窄食单胞菌葡萄糖产酸无色杆菌属土壤杆菌属假单胞菌属动力+OXOX-不动杆菌属+葡萄糖产酸黄色素莫拉氏菌属黄杆菌属---++端鞭毛-+-++产碱杆菌属尿素-+常见非发酵菌的鉴定双岐索引假单菌属按rRNA同源性分为5群及未确定rRNA同源群有关的种。一群需氧、不发酵葡萄糖、无芽胞,有鞭毛、氧化酶阳性的革兰阴性杆

4、菌。多为条件致病菌。第一节假单胞菌属临床常见假单胞菌分群rRNA11.荧光假单胞菌DNA同源群铜绿假单胞菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌2.斯氏假单胞菌DNA同源群斯氏假单胞菌曼多辛假单胞菌3.产碱假单胞菌DNA同源群产碱假单胞菌假产碱假单胞菌2.临床意义分布广泛:水、土壤、空气。人类感染的非发酵菌中,假单胞菌属占70%-80%,铜绿假单胞菌占55%-65%。常见的有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。这些细菌在医院内感染中亦常见。3.微生物特性革兰阴性、无芽胞、专性需氧有端鞭毛或丛鞭毛生长温度范围广,最适生长温度为35℃产生各种水溶性色素:绿脓素、脓红素

5、、荧光素、脓褐素。对理化因素耐受性较强,对多种抗生素耐药。药敏试验药物选择按CLSI(NCCLS)推荐,分为4组:A组:头孢他啶,庆大霉素,美洛西林,替卡西林,哌拉西林。B组:头孢吡肟,头孢哌酮,氨曲南,亚胺培南,阿米卡星,妥布霉素,环丙沙星。C组:头孢噻肟,头孢曲松,氯霉素D组或U组:羧苄西林,头孢唑肟,四环素,诺氟沙星,氧氟沙星,磺胺甲基异恶唑。在自然界分布较为广泛,适应能力强。常引起感染:皮肤、呼吸道、泌尿道、烧伤感染等。慢性肺部感染极为常见。菌血症、心内膜炎、肺囊性纤维变。眼部感染导致角膜穿孔而失明。二、铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌的毒力因子粘附素:粘附结构成分多糖似荚膜

6、物质毒素内毒素:LPS毒力因子外毒素:A阻止真核细胞蛋白质合成S干扰吞噬杀菌作用绿脓素:具有氧化还原活性,催化超氧化物和过氧化氢产生有毒基团酶类弹性蛋白酶:丝氨酸蛋白酶(Las-A)降解弹性锌金属蛋白酶(Las-B)蛋白磷脂酶C:分解脂质和卵磷脂,损伤组织细胞2.生物学特性形态与染色为无芽胞细长的革兰氏阴性杆菌,菌体长短不一,短的呈球杆状,长的为丝状。成对排列或形成短链。无荚膜,在菌体一端有1根鞭毛,运动活泼。革兰氏染色阴性,无抗酸性。培养特性专性需氧菌。生长温度范围为20-42℃;最适温度为35℃,致病性菌可在42℃生长,但在4℃不生长,这可与荧光假单胞菌等进行鉴别。本菌对

7、营养无特殊要求,在普通培养基上生长良好,在选择培养基和麦康凯琼脂、SS琼脂培养基上也能生长。在普通琼脂平板上经18-24小时培养,可形成圆形、边缘不整齐、扁平稍隆起、光滑温润且常呈融合状态的菌落。琼脂被染成蓝绿色或黄绿色。在血琼脂平板上经35℃培养18-24小时,可形成大而扁平、湿润、有金属光泽、有特殊气味之灰绿色、蓝绿色的菌落,并形成透明溶血环。生化特性氧化酶阳性,能氧化分解葡萄糖、木糖产酸,不产气,但产生红脓素或黑脓素的菌株,以及粘液型菌落的菌株可能不分解糖类。本菌能液化明胶,分解尿素,能利用枸橼酸

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